胃癌血清蛋白标记物的筛选与鉴定.pdfVIP

摘 要 胃癌血清蛋白标记物的筛选与鉴定 硕士研究生 李 浩 导 师 王家祥 教授 郑州大学第一附属医院 小儿外科 中国 郑州 450052 摘 要 背景 胃癌一直以来都是严重威胁全世界人类健康的恶性肿瘤之一，也是我国最 常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率常年居高不下。胃癌的预后较差， 尤其以肿瘤发展至进展期为甚，且及早的诊断和治疗可明显的改善胃癌患者的 预后，降低其死亡率。但多数胃癌早期患者没有明显的自觉症状，或仅仅表现 为恶心、呕吐等无特异性的胃肠道症状，容易与胃炎、胃溃疡等相混淆，无法 引起人们的重视，从而延误了病情，错失最佳的治疗时机。往往就诊时多数患 者已经处于局部晚期或发生了远处转移，所以早期的诊断与治疗是改善胃癌患 者预后的关键。目前，临床上诊断胃癌常用的影像学检查主要包括胃镜及上消 化道造影等，但由于医生的诊断水平不尽相同，胃癌早期患者的检出率并不高， 而且胃镜检查是一种有创的检查，会引起患者不适，其费用较高，因而在胃癌 高危人群中不易普及。同时CEA、CA19-9、CA72-4 等作为临床上常用的血清肿 瘤标记物，因缺乏敏感性及特异性对于胃癌患者的早期诊断帮助并不大。在这 样的背景下，临床上迫切需要找到新的与胃癌相关的具有高度敏感性和高度特 异性的分子标记物，这也成为了胃癌相关研究的热点。 蛋白质组学自提出后就得到了飞速的发展，其含义包括蛋白质和基因组两 方面内容，可以理解为一种基因组转录表达的全套蛋白质。蛋白质组学的研究 象征着生物学进入了后基因时代，其本质是以蛋白质组为研究对象，从整体的 角度去分析细胞内动态变化的蛋白质组成及其活动的规律，在建立正常蛋白质 表达指纹图谱的基础上，通过对正常人和患者（血清或瘤体）的蛋白质组进行 比较分析，从而找到与某种疾病有关的特异性蛋白质。这些具有特异性的蛋白 I 万方数据 摘 要 质不仅可以作为某种疾病早期诊断的蛋白标记物，而且也可为药物的研发提供 新的分子靶点。进而对这些蛋白标记物的结构和功能进行研究，为疾病的发生 发展提供病理生理学机制。蛋白质组学被认为是筛选特异性蛋白质标记物和药 物分子靶点最有效的方法之一，随着相关技术不断的更新换代，为我们筛选和 鉴定胃癌患者血清特异性标记物提供了技术平台，开辟了胃癌研究的新领域。 本次实验主要依托表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技 术对胃癌患者血清（术前组、术后组、转移组）与正常对照组血清之间进行对 比检测，筛选出胃癌患者血清中存在的特异性蛋白质或含量与正常人血清有差 异的蛋白质。使用凝胶电泳 （TRICINE-SDS）技术对这些差异性蛋白质进 行分离与纯化。通过基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱 （MALDI-TOF/TOF ）技术对分离纯化的蛋白质进行鉴定，最终确定胃癌患者血 清中具有特异性的蛋白标记物。后期研究其结构与功能，探索特异性蛋白质的 表达与胃癌发生发展的关系，为胃癌的早期诊断及下一步的临床治疗提供了可 能和依据。 目的 通过蛋白组学技术筛选并鉴定胃癌患者血清中可能存在的特异性蛋白标记 物，为胃癌的早期诊断提供更为完善的血清蛋白质指纹图谱模型，为进一步研 究胃癌的血清特异性蛋白标记物打下坚实的基础。