小鼠骨片间充质干细胞分离培养及鉴定-中华细胞与干细胞杂志.pdf

( ) 2013 11 3 4 Chin J Cell Stem Cell (Electronic Edition), Nov 2013,Vol. 3, No. 4 中华细胞与干细胞杂志电子版 年 月第 卷第 期 179 •论著• 小鼠骨片间充质干细胞分离培养及鉴定 马予洁 陈 津 黄梁浒 王庆华 郭子宽 谭建明 【摘要】 目的建立小鼠骨片间充质干细胞(MSC)分离培养及扩增的方法。方法 取 Ⅰ MSC 小鼠胫骨和股骨，洗去骨髓后，用胶原酶 消化疏松骨密质，利用 具有迁徙和贴壁生 结果 2 d 长的能力进行分离。并对获取的细胞进行流式鉴定和诱导分化。 培养 小鼠骨片 边缘爬出成纤维样细胞，呈克隆和鱼群样生长，并可以进行持续传代培养。流式鉴定结果 MSC Scal1 92.7 CD29 98.4 CD90 91.6 显示这群细胞表达 标志 （ ﹪）， （ ﹪）， （ ﹪），不表达造 CD34 1.57 CD45 3.99 CD11b 0.63 血细胞标志 （ ﹪）， （ ﹪）， （ ﹪），并可成功诱导分化成骨细 胞和脂肪细胞。结论 成功建立从小鼠骨片中获得MSC 的方法，为实验研究提供可靠的细 胞来源。 【关键词】小鼠； 间充质干细胞； 骨片； 细胞培养 Isolation, culture, and characterization of mouse bone derived mesenchymal stem cells MA Yu-jie, CHEN Jin, HUANG Liang-hu, WANG Qing-hua, GUO Zi-kuan, TAN Jian-ming. Organ Transplant Institute of PLA, Fuzhou General Hospital, Xiamen University, Fujian Key Laboratory of Transplant Biology and Stem cell application engineering technology research center of Fujian province, Fuzhou 350025, China. Corresponding author: TAN Jian-ming, Email: doctortjm@ Abstract Objective To establish a method for isolation and cultivation of mesenchymal 【 】 stem cells from mouse bone. Methods Methods Tibia and femur were harvested from C57BL/6 mice, and bone marrow was flushed out of the cavity with α-MEM medium. The bone was cut into fragments with scissors and digested with collagenase for 1-2 hours. The digested Ⅰ bone fragments were cultured in the medium for mesenchymal