实验六小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验.ppt

结果观察与分析 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。 吞噬酵母菌的巨噬细胞数 吞噬百分数= 100个巨噬细胞总数 巨噬细胞中吞噬的酵母菌的总量 吞噬指数= 100个巨噬细胞总数 x100% The End 实验六-吞噬细胞功能测定 目的要求 1．掌握小鼠腹腔巨噬细胞的分离方法 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义 吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。 单核/巨噬细胞具有很强的吞噬能力，特别是巨噬细胞，在适应性免疫和固有免疫中均发挥重要作用。 吞噬细胞发育普 主要功能：对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。 巨噬细胞吞噬过程 巨噬细胞功能是衡量机体免疫能力的一个很重要指标 测定方法：主要是巨噬细胞的吞噬功能实验，其他的有溶酶体酶活性检测和表面受体检测。 本实验是通过小鼠巨噬细胞对酵母菌的吞噬来检测巨噬细胞的功能 实验用品 1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、 载玻片、吸管等 2．试剂： 生理盐水；PBS；快速姬姆萨染液。 3．材料：小白鼠；酵母菌（浓度为8*106/ml） 方法与步骤 将菌液置于70℃水浴锅中加热20min以灭活酵母菌，置4 ℃冰箱备用。 脱椎致死 吸取腹腔液 小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备 分离腹腔巨噬细胞 1、剪开腹部皮肤 2、将左下方腹膜剪开一小口，暴露腹腔 3、用移液器吸取2mL PBS注入腹腔中，轻柔腹部1-2min 4、再用吸管吸取腹腔洗液于15ml离心管中,定容到5ml 5、1500rpm,离心5min，弃上清 6、5ml PBS重悬细胞，1500rpm,离心5min，弃上清 7、300μL PBS重悬细胞 在干净的载玻片上用记号笔画一个直径约2cm的圆圈，在圆圈内滴加50μL细胞悬液，再向其中加50μL酵母液，混匀后放入湿盒内并于37℃温箱孵育30分钟。 巨噬细胞吞噬酵母菌 用生理盐水轻轻冲洗并甩干，加1-3滴试剂一染色1.5min； 加3-6滴试剂二，轻摇玻片使其充分混匀，脱色5-8min； 自来水轻轻冲洗； 待干燥后加显微镜油于100倍目镜下观察。 细胞染色