第八章蛋白质分选与膜泡运输(第4版).pptVIP

（二）Rabs 也叫targeting GTPase，属于G蛋白，起分子开关作用。已知30余种，不同膜上具有不同的Rabs。 Rabs促进和调节运输小泡的停泊和融合。 Rabs还有许多效应因子，帮助运输小泡聚集和靠近靶膜，触发SNAREs抑制因子。 Rabs in docking 复习思考题 1. 名词解释： 信号肽；共翻译转运；后翻译转运 2. 什么是分泌性蛋白合成的信号肽学说？涉及哪些组分？各组分间是如何协同的？ 3. 蛋白分选转运的方式有哪几类？ 4. 包被蛋白主要有哪几种？其主要作用是什么？ 5. 三种包被小泡各自介导哪些运输方向？ 6. SNAREs 主要功能是什么？主要有哪几种类型？ 推荐阅读文献 知识回顾Knowledge Review /cooper5e/animation1001.html /guawang/cell/65_69.htm 因为去垢剂能够破坏内质网的膜,使合成的蛋白质暴露于蛋白水解酶遭到降解。若无去垢剂,多肽在合成的同时就向内质网转运,所以不受蛋白水解酶的影响。 研究结果发现,杂合蛋白出现在ER腔中,而且信号序列被切除了。这一研究结果不仅证实了信号假说的正确性,也揭示了信号序列的一个重要特性:信号序列没有特异性,并且原核生物的信号序列在真核生物中也是有效的。 靶向线粒体基质的跨膜运送 靶向线粒体膜 间隙的跨膜运送 途径A是主要的 注意与内膜蛋白途径A不同点 ①一次性穿膜蛋白 ②二次穿膜蛋白 ③多次穿膜蛋白 线粒体内膜蛋白的输入 ①一次性穿膜蛋白 如细胞色素氧化酶的CoxVa亚基，其前体蛋白的N末端含有基质定位序列，此序列可被TOM20/22输入受体识别，通过外膜的通用输入孔和内膜的TIM23/17转移复合物输入到基质中。输入过程中，基质定位序列被切除。CoxVa含有一个疏水性停止转移序列(stop-transfer sequence)，当蛋白质穿过TIM23/17通道时，停止转移序列阻止C-端穿过内膜，然后肽链转移到脂双层中。 ②二次穿膜蛋白 肽链含有基质定位序列和2段内部疏水区(Oxl 1定位序列)，肽链进入基质后，基质定位区被切除。Oxl 1疏水区被内膜中的Oxa 1蛋白所识别，并将蛋白质插入脂双层中。 ③多次穿膜蛋白 这类蛋白质N末端没有基质定位序列，而肽链内部含有多个定位序列。如ADP/ATP对向转运体(antiporter)，此蛋白含有6个穿膜区为定位序列，外膜中的TOM70可识别内部定位序列。通过外膜的通用运输孔穿过外膜，在膜间隙中的TIM9/10的协助下，蛋白质被移送到内膜中的转移复合体(由TIM22/54组成)，负责将输入蛋白的疏水性定位序列移入内膜脂双层中。 靶向线粒体内膜的跨膜运送 TOM: translocon of the outer membrane Tim: translocon of the inner membrane 外膜蛋白质的输入 停止转移信号 为N-端基质定位序列之后一段疏水性氨基酸片段 可阻止蛋白质进入基质，同时使蛋白质结合到外膜 此途径中，蛋白质输入后，其基质定位序列和内部疏水性序列均不切除。 4、膜间隙蛋白质的输入 ① 主要途径 ② 穿外膜直接途径 ②穿外膜直接途径 输入蛋白质通过外膜的TOM40通用输入孔，直接将蛋白质释放到膜间隙中，不涉及到内膜，与内膜转移因子无关。例如细胞色素c血红素裂合酶(负责血红素与细胞色素c共价结合)，是一种线粒体膜间隙蛋白。 ①主要途径 前体物肽链中含有两个不同的N末端定位序列。例如细胞色素 b2，进入基质后，N末端第一个序列被基质中的蛋白酶切除。第二个序列阻止肽链完全穿过内膜，前体物变成内膜TIM23/17通道中的中间物。中间物侧向扩散，离开TIM23/17通道。内膜中的蛋白酶切除穿膜的疏水性片段，将成熟的蛋白质以可溶性形式释放到膜间隙中。 线粒体输入蛋白定位序列的排列形式 大多数线粒体蛋白含有N末端基质定位序列，但各种蛋白质的不相同。 核基因编码的线粒体蛋白不都是通过前述途径转运的 有的线粒体外膜蛋白无前导序列，不以前体形式运送插入 细胞色素c可能是直接扩散通过外膜而进入线粒体，再在细胞色素c-血红素裂合酶催化下，加上血红素后成为成熟型并定位于内膜外侧。 注意！ 膜泡运输是蛋白分选的一种特有方式 膜泡运输还形成了细胞内复杂的膜流(membrane flow) 转运膜泡出芽发生在特定区域：蛋白信号与受体结合部位 转运泡在细胞内沿微管或微丝运输：膜泡运输有关的马达蛋白有3类（详见细胞骨架章节） 动力蛋白（dynein）：趋向微管负端 驱动蛋白（kinesin）：趋向微管正端 肌球蛋白（myosin）：趋向微丝的正极 第二节 细