细胞与细胞工程讲义.ppt

如何培育出上结大豆、下结花生的新品种？ 请你们讨论后设计 案例二 二、植物体细胞杂交过程 植物细胞 A（大豆） 植物细胞 B（花生） 原生质体 A 原生质体 B 再生出细胞壁 方法？ 促融方法？ 类型？ 遗传物质？ 优点？ 去除细胞壁 原生质体融合 杂种植株(大豆花生) 细胞分裂 愈伤组织 杂种细胞 植物体细胞杂交的过程： 小 结 D.筛选和组织培养。 C. 植物细胞A和植物细胞B杂交时，产生了AB和AA、BB型融合细胞。 B.诱导融合：注意物理方法的类型和化学方法的药剂——聚乙二醇。 A.制备原生质体：用纤维素酶、果胶酶分解细胞壁。 乙型脑炎是严重的中枢神经系统损伤为主要表现的急性病毒性传染病，至今无特效治疗方法，病死率约10-15％，至残率约15-50％。亚太地区年发病人数在10万左右，我国约2-3万，造成社会、经济上的极大损失。乙型脑炎单克隆抗体可有效阻止病毒对神经细胞的攻击，为乙脑特效治疗开辟新的途径，可减少病死率及致残率，不仅有较大的社会效益，也有较高的经济效益。 简单描述生产乙型脑炎单克隆抗体的流程。 该过程包含了哪些工程技术？ 讨论 案例三 骨髓瘤细胞？ 选出能产特定抗体细胞群、继续培养 体外培养 从培养液中获取 促融方法？ 三、单克隆抗体制备过程 原代培养（10代） 传代培养40～50代 细胞株 跨50代 细胞系 用胰蛋白酶处理成单个细胞 抗原？ 淋巴细胞？ 体内培养 从腹水中提取 单克隆抗体 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 设想： 用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。 单克隆抗体的应用 单克隆抗体的实验成功，不仅在生物学基础理论的研究中具有重要意义，而且在实践上也有很高的实用价值。单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性非常明显。国内外已有多种单克隆抗体实现商品化，制成单抗诊断盒，有的已投放市场。人们正在研究用单克隆抗体治疗癌症，就是在单抗上连接抗癌药物，制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞，又不会伤害健康细胞。 概念汇总 1、动物细胞培养 细胞培养按细胞的来源不同可以分为原代培养和 传代培养。 1.为什么将组织取出后，要用胰蛋白酶处理分散成单个细胞？ 2.细胞株和细胞系的区别 B. 传代培养 细胞在培养容器的表面长满后，可以用胰蛋白酶把细胞消化下来，使其分散为悬浮的单个细胞，用培养液稀释后，重新接种于新的培养容器中继续培养。传代细胞分为细胞株和细胞系两大类。 A. 原代培养 培养的细胞直接来源于动物的组织叫原代培养。动物的组织可以取自胚胎，幼小的动物或成年的动物，可以是病理性的，特别是肿瘤组织。具体做法是：先将组织尽量剪碎，然后用胰蛋白酶液消化成分散的细胞，过滤除去纤维类物质，再把细胞放到培养液中培养。 植物细胞和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体培养基 液体培养基 培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 培养结果 植物体 细胞株、细胞系 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得细胞或细胞分泌蛋白 2、动物细胞融合 细胞融合是指两个或两个以上的细胞融合为一体的现象。它可以是自然发生的或人工诱导的。自然界中细胞融合是经常发生的，有性生殖中精卵结合是其中的例子。人工诱导的细胞融合是利用诱导剂使细胞或原生质体融合在一起。动物细胞融合要求掌握的情况与植物相似。如过程、方法、诱导条件（剂）、结果等。 植物体细胞杂交和动物细胞融合得比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合的原理 细胞膜的流动性、植物细胞全能性 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去处细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 这只老鼠身上的“人耳”是由我国科学家曹谊林教授利用细胞工程技术复制出来的。 动物细胞培养技术应用 克隆器官：皮肤、耳朵 检测有毒物质 细胞治疗：干细胞 蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、酶、激素、生长因子、单抗 单抗的应用和特点 诊断、治疗和预防疾病 治疗癌症等病（生物导弹） 特异性强、灵敏度高、纯度高 多莉——细胞工程的一个里程碑！ 哪些生物技术属于“克隆”？ 营养生殖（扦插、嫁接） 植物组织培养 动物细胞培养 动物个体的克隆（体细胞核移植和胚胎移植） 单克隆抗体 DNA扩增 育种专题 杂交育种 诱变育种 多倍体育种 单倍体育种 三系配套杂交