中国药大-国家新药筛选实验室制作临床前研究精编PPT课件.ppt

5）要重视脏器病理组织学指标的全面检查，出具正式病理部门签章的、书写规范（高剂量组、空白对照组）的22个脏器的病理报告书，并提供病理照片（尤其是表现出病变的脏器）。 毒理学试验结果的综合分析 ⒈分析目的： 数据变化是否与受试物有关；以确定无毒反应剂量、毒性反应剂量及安全剂量范围。 2. 差异的生物学意义与统计学意义的关系：  没有统计学意义不等于没有生物学意义； 有统计学意义也不等于有生物学意义； 分析原则：综合分析，注意系统性和关联性。 3.分析步骤 分析计数和计量资料，数据属于正态分布，用t检验或方差分析；数据是非正态分布，应用非参数统计分析Ridit或秩和检验（如半定量的计分数据）①是否有差异及统计学意义；②差异是否有生物学意义。 4.具体分析方法（计数和计量资料） 统计学家：往往强调P值，不考虑实际情况； 临床医生：更多考虑临床的实际意义； 药理毒理工作者：应将二者结合起来考虑，才是客观、可信、可靠的结论。 ?不能只求与对照组的比较，还要说明给药组两两之间的比较，以说明并分析量—毒关系。 如尿量、RBC、WBC及血小板计数等，由于系统误差可能有统计学意义，P＜0.05，但因为一般都在正常范围内（指自己实验室的背景值范围）的波动,无量毒关系，所以无临床的实际意义。 ?综合考虑同一指标的均数计量和个体计数结果的统计学和生物学意义。 如：ALT的“均数?SD”，往往因SD过大而使各组间的统计学分析无显著差异。 此时应注意分析，SD过大通常是由于某几例动物个体数值的异常变化所致。虽然统计学无差异，但就某一个体来说，其数据的变化是异常的。此时，应列出个体数据再加以分析。 注意选择敏感指标 如：血液检查常常只注意红细胞计数而忽视网织红细胞的检查。事实上RBC计数不论在反映溶血或反映红系造血抑制上都不灵敏。因为RBC寿命很长，120d。在此期间，骨髓红系造血即使受到抑制，外周血也表现不出来，因为机体可以从贮存库将红细胞动员出来，外周血的红细胞不致明显下降。但网织红细胞却是一个很敏感的指标，其计数下降表明红系造血障碍和溶血加强。不能因为RBC无统计学意义而忽略其可能的毒性，甚至是毒性靶器官。 又如：ALT、AST、ALP、Tbill是检测肝功的指标。ALT是敏感指标；AST受标本溶血影响大；ALP受动物年龄影响大，应强调组间对照。ALP、AST非肝脏特异性酶，也可来自机体的其他器官，在分析时要注意。 狗BUN在天热时升高，320C以上可升高30%-50%；TP、ALB在营养不良或肝、肾功能长期损害时可降低，当免疫功能增强（感染）或自身免疫功能亢进时球蛋白增高，相反则降低。 所以，既要注意毒性相关指标系统的综合分析，来判断出毒性靶器官；也要将试验中出现的异常情况反映在申报资料上，便于审评者得出合理、正确的判断。 ? 重视脏器组织病理学检查及结果的量化 血中BUN、Cr在肾脏轻度损伤时其值仍正常，此时病理结果的判断十分重要； 尸检器官重量降低，提示该器官萎缩或发育不良；器官重量增加可能充血、肥大或新生物。 病理检查一般可见灶性炎症、炎性细胞浸润、灶性出血、淤血及可疑细胞变性，它们均可能与受试药无关，可因自身感染、宰杀方法等造成，但要如实描写，不能只写成“未见病理改变”。 病理变化最好半定量：无病理变化（-）为0分，可疑（±）为0.5分，轻度（+）为1分，中度（++）为2分，重度（+++）为3分，这些非正态分布的数据要进行统计学分析。 ?分析受试动物流行病学的背景资料 动物饲养条件、工作人员的责任心等等，有必要结合参考；?结合药代动力学和其他毒理实验结果来分析?考虑文献资料和所在实验室正常值范围 不同时间点检测数据的波动情况；自己实验室的(data background)正常范围值。 5．尤其要注意别将动物结果不加分析地外推到人。更不能忽略甚至故意舍掉已看到的毒性反应。 新药申报资料中的常见问题分析 试验设计欠合理（不符合前面讲述的原则），最主要在剂量、周期和结果分析上。 ▲每组动物数不够，试验中期、给药 结束、恢复期结束缺少足够的统计 样本数 ▲试验设计在时间上缺乏合理的预见 性，脱离临床指导原则中有关疗效 评价的时限要求 ▲ 药效试验中的阳性结果，在大剂量、长期给药的情况下动物却是另一种表现（大多是没有反应），难以相信试验的科学性。 ▲ Rat雌、雄的摄食量和体重合并统计： 不妥！ 因为随时间的延长，如6个月时间，雄性大