第二章 遗传的物质基础DNA2.pptVIP

第二章 　遗传的物质基础 一．遗传物质的发现 以四种碱基构成的脱氧核苷酸或核苷酸为基本单位通过3，5-磷酸二酯键连接成链状结构构成其一级结构 核酸的理化性质 DNA变性与复性 DNA芯片（基因芯片） DNA芯片（DNA chip）技术，实际上就是利用核酸杂交的原理，将不同序列的DNA片段（探针）印记到小玻片或相应介质上，然后将待检测DNA（带有标记）液与之孵育，经洗脱后，检测最终能够发生结合的DNA，从而判定待检测DNA序列的技术。 （二） 核酸测序 Sanger的酶学测序原理 Gilbert的化学测序法 自动测序仪的发明 DNA序列测定常用方法有如下3种： Maxam-Gilbert化学裂解法  化学裂解（直读，Sanger双脱氧末端法也是直读法）法是Maxam和Gilbert等人1977年创建的，用来测定DNA序列。化学法是用化学试剂在A、G、C、T处特定地裂解DNA片段，产生一簇各种长度的短链（等差数列 n=1），经过PAGE和放射自显影后，可以直接读出DNA的顺序。 某些试剂能修饰或破坏DNA链上特定核苷酸的碱基进而使N-糖苷键断裂，暴露出的糖环以β-消除反应，在3’和5’位上断裂磷酸二酯键。使戊糖脱落，用于嘌呤环的试剂是硫酸二甲酯，而联氨可用于肼解嘧啶环。 化学裂解法测序的原理 1、用放射性核素标记待测DNA一侧末端 2、将标记DNA