饲料中总磷的测定.pptVIP

实验6 饲料中总磷的测定;饲料中总磷的测定（钼黄比色法）;3.仪器和设备 实验室用样品粉碎机或研钵 分样筛：孔径0.42mm(40目) 分析天平：感量0.0001g 分光光度计，有10mm比色池，可在400nm下进行比色测定 高温炉：可控温度在（550±20）℃ 坩埚：瓷质 容量瓶：50，100，1000mL 刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL 凯氏烧瓶：250 mL或500mL 可调温电炉：1000W ;饲料中总磷的测定（钼黄比色法）;标准方形池 ●上开口，Teflon（聚四氟乙烯，即特富龙。是一种树脂）盖子，不密封 ● 两面透光 ● 内部抛光，精细打磨 ● 适用于所有标准池支架 ;4.试剂及配置 盐酸溶液：1＋1,V+V 浓硝酸 高氯酸 磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105℃干燥1小时，在干燥器中冷却后称0.219 5g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml（？），用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50μg/ml的磷标准溶液 ;4.试剂及配置 ⑤钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵（分析纯）1.25g，加硝酸250ml，另取钼酸铵（分析纯）25g，加蒸馏水400ml加热溶解，冷却后，将此溶液倒入上溶液，加蒸馏水定容至1000ml，避光保存。如生成沉淀则不能继续使用 钼酸铵：用作生产高纯度钼制品的基本原料 健康危害： 吸入、摄入或经皮肤吸收后对身体有害，对眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用 环境危害： 不燃，有毒，具刺激性 ;5.试样的选取和制备 取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目 装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质 ;6.测定步骤 （1）试样的分解 干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料）：称取试样2—5g于坩埚中（准确至0.000 2g），在电炉上低温炭化至无烟为止，再放入高温炉于（550±20）℃下灼烧3小时（或测灰分后继续进行），取出冷却，在坩埚中加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10分钟，将此溶液转入100ml容量瓶中，并用热水洗涤坩埚及漏斗中滤纸，冷却至室温后，定容，摇匀，为试样分解液;6.测定步骤 （1）试样的分解 湿法：称取试样0.5～5g于凯氏烧瓶中（准确至0.000 2g）。加入硝酸（化学纯）30ml，小心加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸（分析纯）10ml，继续加热煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险!）。冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液 ;6.测定步骤 （1）试样的分解 盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）：称取试样0.2～1ｇ（精确至0.000 2g）于100ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml使其全部溶解，冷却后转入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液;6.测定步骤 （2）标准曲线的绘制 准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（μg）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线 ;PS： 吸光度测试方法： 1.按动“功能键”，切换至透射比测试模式 2.调整测试波长 3.置入遮光体，合上样品室，并使其进入光路，按动“调0%T”键调T零，此时仪器显示“00.0”或“-00.0。完成调T零后，取出遮光体 4.按动“功能键”，切换至吸光度测试模式 5.置入参比样品，按动“调100%T”键，此时仪器显示“BL”延时数秒后便显示“-.000”或“.000” 6.置入待测样品，读取测试数据 ;饲料中总磷的测定（钼黄比色法）;6.测定步骤 （3）试样的测定 准确移取试样分解液1—10ml（含磷50－750ug）容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测得试样分解液的吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量;6.测定步骤 （4）测定结果计算 试样中总磷的质量分数按下式计算 W(P)=a*10-6(V/V1)/m 式中： m:试样质量，g V:试样分解液总体积，ml V1:比色测定时所移取试样分解液体积，ml a:由标准曲线查得试样分解液含磷量，μg/50ml 10-6:从μg转化为g的系数所得结果应精确到两位小数; 重复性:每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果 含磷量在0.5％以下（含0.5％）以允许相对偏差3％ 含磷量在0.5％以下，允许相对偏差10％ ;注意