PCR技术在肿瘤检测及治疗中的应用.docVIP

2001 年 11 月第 19 卷第 2001 年 11 月 第 19 卷第 6 期 安徽教育学院学报 Jo u rna l o f A nh u i In st itu te o f E duca t io n N o v. 2001 V o l. 19 N o. 6 技术在肿瘤检测及治疗中的应用 PCR 张化东1 (1 安徽省肥东高亮中学, 安徽 肥东 231613; 2 傅蕙英2 安徽教育学院生物系, 安徽 合肥 230061) 聚合酶链反应 (p lo ym e ra se ch a in reac t io n ) 简称 PCR , 由 C e tu s 公 司 的 科 学 家 K a ry M u llis 等 人 1985 年发明。 PCR 技术的问世, 引起分子生物学技 术上的一场革命, 并在遗传学、法医鉴定、疾病诊断、 肿瘤防治、人类基因组计划等方面得到了广泛的应 用。本文就 PCR 技术在肿瘤检测及治疗上的应有作 一综述。 1 PCR 技术的特点及其衍生的技术 PCR 技术是在模板 DN A 、引物, 四种脱氧核苷 酸存在的条件下, 依赖 DN A 聚合酶的酶促合成反 应。它可在短时间里, 在试管中获得数百万个特异的 DN A 序列的拷贝, 因而使过去方法不能检测的微量 靶序列, 甚至是一个拷贝, 得以检出。其反应分三步, 即变性、复性、延伸。 这种变性—复性—延伸的过程 就是一个 PCR 循环, PCR 就是在合适的条件下的 这种循环的不断反复。通过多次以上的这种循环, 使 得 DN A 得到大量的复制, 数量多达 2×106 - 107 拷 贝。1 随着 PCR 技术的逐步发展, 其衍生技术也以惊 人的速度发展着, 目前已达数十种。 主要有: 逆转录 PCR , 多重 PCR , 免疫 PCR , 巢式 PCR , 荧光 PCR , 定量 PCR 等等。 这些技术的发展不仅丰富了 PCR 技术, 而且在生物学, 医学等学科研究上带来了深刻 的影响。 特别是在和肿瘤有关的基因的分析中发挥 着重要的作用。 2 肿瘤防治的回顾 半个世纪以来, 医学科学的发展, 取得了巨大的 成就, 人类基本上控制了以往主要威胁人类健康的 传染病, 而肿瘤, 心血管等疾病逐渐成为人类健康的 主要敌人, 其中尤以肿瘤为甚。 外科手术, 及随后发 展起来的化疗、放疗一直是人类治疗肿瘤的主要方 法, 并取得了一些效果。 但事实告诉我们, 这些方法 均有其局限性, 疗效并不能令人满意, 于是人们开始 探索治疗肿瘤的新途径。 随着研究的深入, 人们逐步了解到, 细胞基因的 恶变是肿瘤发生的主要机制。肿瘤基因, 特别是癌基 因和抑癌基因的研究, 使人们对肿瘤发生的认识进 行了一个新的水平。 随之一个新的能有效地治疗肿 瘤的方法—基因疗法诞生了。基因疗法的产生, 借助 了新的技术的产生和运用, 其中 PCR 技术的问世和 发展, 为这些新疗法的运用奠定了坚实的基础。 3 PCR 技术在肿瘤检测和治疗中的应用 3. 1 在癌基因研究上的运用 癌症是威胁人类生命的第一或第二位疾病, 其 主要的特征是肿瘤细胞肆无忌惮地增殖, 极具破坏 力, 置人于死地。 为攻克这一难题, 科学家们一直孜 孜不倦地研究着。1970 年, 随着M a r t in 发现第一个 致癌基因 (即鲁斯肉瘤病毒的致癌基因) src 后, 一些 致癌基因也陆续被发现。癌基因被不正常激活后, 能 和其他因素的联合作用导致细胞癌变, 因而对癌基 因作用机制的研究成为科学家们为攻克肿瘤而努力 的方向。 癌基因 ra s 家族有 ra sH - 1, ra sH - 2, ra sK - [ 收稿日期 ] 2001- 05- 20 [ 第一作者简介 ] 张化东, 安徽省肥东高亮中学教师。 摘 要: 本文概述了聚合酶链反应技术在癌基因、抑癌基因、端粒酶的活性、肿瘤病毒、肿瘤免疫的研究及常见 肿瘤的检测及预后等方面的应用。 关键词: 聚合酶链反应; 肿瘤; 基因治疗 中图分类号: Q 25 文献标识码: A 文章编号: 1001- 5116 (2001) 06- 0049- 03 A pp l ica t ion of PCR Techn ique in A ssay of Neop la sm s an d Therapy of Tum or s (Z H A N G H u a - d ong 1 , FU H u i - y ing 2 (1 G aol ing M id d le S ch ool, F e id ong