生物实验室常用试剂的配制.PPT

生物实验室常用试剂的配制 一、检验酸碱性的试剂 1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。 2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至蓝色。 3.溴甲酚紫指示剂 将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中，加蒸馏水稀释至250mL制得。当pH值由6.2~6.8时，颜色由淡黄色变为淡紫色，变色点在pH6.7。 二、定性鉴定某些物质的试剂 1.鉴定葡萄糖的试剂 (1)班氏(Benedict)试剂 a.在600mL蒸馏水中溶解173g柠檬酸钠和100g无水碳酸钠，冷却后稀释到850mL。 b.在100mL热蒸馏水中溶解17.4g无水硫酸铜。冷却后稀释到150mL。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠－碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如产生沉淀。要过滤，班氏试剂配制后能长期使用。如存放较久而产生沉淀时，可取上层清液使用，不必重配。 (2)裴林氏(Fehlings Solution)试剂 a.取35g硫酸铜溶解在400mL蒸馏水里，加蒸馏水到500mL。 b.取85g氢氧化钾 (或70g氢氧化钠)和175g酒石酸钾钠，溶解在400mL蒸馏水里，加水馏水到500mL。 上述两种溶液耍分别保存，使用时再等量地混和并搅拌。如溶液里有葡萄糖，加等量裴林试剂，煮沸，会产生红色的氧化亚铜沉淀。 2.鉴定淀粉用的碘液 取2g碘化钾，溶解在10mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。即成碘液。溶液在光亮处容易变成氢碘酸，须保存在棕色玻瓶里。因为I2，不易溶于水，当加入KI后可大大增加I2的溶解度。 3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。 4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。 5.鉴定DNA的二苯胺试剂 A液:1.5g二苯胺溶于1OOmL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸用棕色瓶保存 B液:体积分数为0.2%的乙醛溶液。 实验前，将0.1mL的B液加入到10mL的A液中，现配现用。 6.鉴定二氧化碳的试剂 (1)石灰水 取饱和石灰水澄清液，密闭瓶内备用。 (2)氢氧化钡 (Ba(OH)2) 在蒸馏水中加氧化钡。氢氧化钡遇到二氧化碳，也会生成碳酸钡白色沉淀，使溶液浑浊。 (3)溴代麝香草酚蓝溶液 取0.1溴代麝香草酚蓝，溶解在100mL蒸馏水里，滴入少量0.1%氢氧化钾溶液，使它成为碱性溶液而呈蓝色。本溶液pH值变化范围是6.0(黄)至7.6(蓝)。待测物中如有二氧化碳，会形成碳酸而使溶液变成黄色。 　三、分离液 　1.用于分离肌纤维的试剂 　(1)马克凯郎(MaecalIum)氏液 也叫硝酸甘油溶液，取1份浓硝酸、2份甘油、2份水混合制得。适于分离横纹肌和心肌组织。 　(2)30%氢氧化钾溶液或30%氢氧化钠溶液 肌肉小块浸泡时间0.5一1小时。 2.用于分离神经细胞的试剂 　(1)甲醛－生理盐水溶液 称取58.44g氯化钠，用蒸馏水溶解，再稀释到1000mL加入2g40%甲醛溶液，可得甲醛－生理盐水溶液。这种溶液也是很好的上皮细胞分离液，既分离迅速，又能保护纤细的上皮细胞纤毛。在上述溶液里，分离小肠和气管上皮组织需2小时，口腔和皮肤上皮组织需3天。 　 (2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。 　 3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶解在100mL水中即成。 　 4.用于分离植物根尖细胞的试剂 　(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即成盐酸乙醇溶液。密闭保存。 　(2)4%盐酸溶液。