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第一章 绪论
DNA重组技术和基因工程技术。
DNA重组技术又称基因工程技术,目的是将不同DNA片段(基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。
DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究的结晶,而限制性内切酶DNA连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立的关键。
DNA重组技术有着广泛的应用前景。首先,DNA重组技术可以用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽,如激素、抗生素、酶类及抗体,提高产量,降低成本。其次,DNA重组技术可以用于定向改造某些生物的基因结构,使他们所具有的特殊经济价值或功能成百上千倍的提高。
请简述现代分子生物学的研究内容。
1、DNA重组技术(基因工程)
2、基因表达调控(核酸生物学)
3、生物大分子结构功能(结构分子生物学)
4、基因组、功能基因组与生物信息学研究
第二章 遗传的物质基础及基因与基因组结构
核小体、DNA的半保留复制、转座子。
核小体是染色质的基本结构单位。是由H2A、H2B、H3、H4各两分子生成八聚体和由大约200bp的DNA构成的。核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一步。
DNA在复制过程中,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。因此,每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,这种复制方式被称为DNA的半保留复制。
转座子是存在染色体DNA上的可自主复制和移位的基本单位。转座子分为两大类:插入序列和复合型转座子。
DNA的一、二、三级结构特征。
DNA的一级结构是指4种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序,表示了该DNA分子的化学构成。
DNA的二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。分为左手螺旋和右手螺旋。
DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式,可分为正超螺旋与负超螺旋两大类。
DNA复制通常采取哪些方式?
1、线性DNA双链的复制:复制经过起始、延伸、终止和分离三个阶段。复制是从5’端向3
2、环状DNA双链的复制
(1)θ型:是一种双向复制方式。复制的起始点涉及DNA的结旋和松开,形成两个方向相反的复制叉,复制从定点开始双向等速进行。
(2) 滚环型:是单向复制的一种特殊方式,发生在噬菌体DNA和细菌质粒上,首先对正链原点进行专一性的切割,形成的5’端被单链结合蛋白所覆盖,3
(3) D-环复制:也是单向复制的一种方式。是在线粒体DNA中发现的。两条链的合成是高度不对称的,最初只以一条母链为模版合成,迅速合成互补的新链,另一条则成为游离的单链环(即D环)。
真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控?
1、细胞生活周期水平调控:决定细胞停留在G1期还是进入S期。
2、染色体水平调控:决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S期起始复制。
3、复制子水平调控:决定复制的起始与否,并且是高度保守的。
DNA 修复包括哪几种?
错配修复:识别新合成链中的错配并加以校正,保证子链的正确性。
切除修复
1)碱基切除修复:切除突变的碱基
2)核苷酸切除修复:修复被破坏的DNA
3、DNA直接修复:修复嘧啶二聚体或者甲基化DNA
第三章 生物信息的传递--RNA转录与加工
定义:Pribnow box,编码链,上升突变,增强子。
在原核生物启动子被保护区内有一个由5个核苷酸组成的保守序列TATATT,是聚合酶结合位点,称为Pribnow区,其中央大约位于起点上游10bp处,所以又称为–10区。
在DNA的两条链中与mRNA序列相同的那条DNA链是编码链或称有意义链。
如果增加Pribnow区的共同序列,将乳糖操纵子的启动子中的TATGTT变成TATATT,就会提高启动子的效率,称为上升突变。
在一些转录单元上发现其转录起始位点上游约200bp处有两段72bp长的重复序列,它们不是启动子的一部分,但能增强或促进转录的起始,因此,称这种能强化转录起始的序列为增强子或强化子
简述生物体内RNA的种类和功能。
生物体内拥有三种RNA,即:
编码特定蛋白质序列的mRNA;
能特异性解读mRNA 中的遗传信息并将其转化成相应氨基酸后加入多肽链中的tRNA;
直接参与核糖体中蛋白质合成的rRNA。
什么是DNA模板与mRNA及蛋白质产物之间的共线性关系?
核苷酸特异性的组成和排列顺序决定了贮存在DNA上的遗传信息,并通过转录mRNA传递遗传信息,此过程是从起始核苷酸开始,一个脱氧核苷酸对应一个核苷酸,不重叠,不跳跃,一一对应。mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这
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