肠道病原菌的分离和鉴定.pptVIP

肠道病原菌的分离与鉴定一 培养基的制备及常用培养基 细菌的培养法 EMB培养基的制备 肠道病原菌的分离与鉴定（一） 血清学检测-肥达氏反应 培养基的制备 (一)肉汤培养基 材料：鲜牛肉、蛋白胨、氯化钠、pH试纸、10％碳酸氢钠、试管、三角烧瓶、蒸馏水等。 方法 1．将新鲜牛肉500g切碎或搅碎，加水1000ml，放4℃冰箱或冷处浸泡过夜，然后煮沸30min，放凉，使残余的脂肪凝固，再用绒布或滤纸过滤，将滤液补足为原量。 2．1000ml肉水中加入蛋白胨10g、氯化钠5g，加热溶解。 3．用精密pH试纸测酸碱度，用10％碳酸氢钠校正pH为7.2左右。过碱时，可用10％醋酸校正之。 4．分装于试管中或三角烧瓶中，15磅(121℃)高压蒸气灭菌20～30min。 (二)普通琼脂培养基 材料：肉水、蛋白胨、氯化钠、琼脂、无菌平皿、灭菌试管、三角烧瓶等。 方法 1．按上记数量把肉水、蛋白胨、氯化钠和琼脂放到三角烧瓶中，加热溶化。 2．用pH试纸测酸碱度，用10％碳酸氢钠校正pH为7.2左右。 3．15磅高压蒸气灭菌20～30min。 4．趁热将溶化的培养基倒入灭菌平皿内，每个平皿倒入约15ml，凝固后即成普通琼脂平板培养基；如趁热将培养基倒入灭菌试管内，再将试管斜放试验台上，凝固后即成普通琼脂斜面培养基。 (三