磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷.docVIP

磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷 1 适用范围和应用领域 本法引自海洋监测规范，适用于海水中活性磷酸盐的测定。 水样经0.45 μm滤膜过滤后贮于聚乙烯瓶中。若样品采集后不能立即分析，则应快速冷冻至-20℃ 2 方法原理 在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于882 nm波长测定吸光值。 3 试剂及其配制 除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。 3.1 硫酸溶液：c(H2SO4)=6.0 mol/L 在搅拌下将300 mL硫酸(H2SO4，ρ=1.84 g/mL)缓缓加到600 mL水中。 酒石酸锑钾-钼酸铵混合溶液 钼酸铵溶液： 溶解28 g钼酸铵〔(NH4)6Mo7O24·4H2O〕于200 mL水中。溶液变混浊时，应重配。 酒石酸锑钾溶液： 溶解6 g酒石酸锑钾(C4H4KO7Sb·H2O)于200 mL水中 ，贮于聚乙烯瓶中。溶液变混浊时，应重配。 混合溶液: 搅拌下将45 mL钼酸铵溶液加到200 mL硫酸溶液中，加入5 mL酒石酸锑钾溶液，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。 3.3 抗坏血酸溶液 溶解20 g抗坏血酸(C6H8O6)于200 mL水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可稳定1 3.4 磷酸盐标准贮备溶液：ρp=0.300 mg/mL 称取1.318 g磷酸二氢钾(KH2PO4)，优级纯，在110～115℃烘1～2 h)溶于10 mL硫酸溶液及少量水中，全量转入1 000 mL量瓶，加水至标线，混匀，加1 mL三氯甲烷(CHCl3)。此溶液1.00 mL含0.300 mg 3.5 磷酸盐标准使用溶液：ρp=3.00 μg/mL 量取1.00 mL磷酸盐标准贮备溶液至100 mL量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCl3)。此溶液1.00 mL含3.00 μg磷。有效期为一周。 4 仪器及设备 分光光度计。 5 分析步骤 5.1 绘制标准曲线 5.1.1 量取磷酸盐标准使用溶液0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00 mL于50 mL具塞比色管中，加水至50 mL标线，混匀。各浓度依次为0，0.030，0.060，0.120，0.180，0.240 mg/L。 5.1.2 各加1.0 mL混合溶液，1.0 mL抗坏血酸溶液，混匀。显色5 min后，注入5 cm测定池中，以蒸馏水作参比，于882 nm波长处测定其吸光值Ai。其中零浓度为标准空白吸光值A0。 5.1.3 以吸光值(Ai-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。 5.2 水样测定 量取50 mL经0.45 μm微孔滤膜过滤的水样至具塞比色管中，按标准曲线绘制的步骤测定吸光值Aw。 同时量取50 mL水按相同步骤测定分析空白吸光值Ab。 6 记录与计算 据(Aw-Ab)值在标准曲线上查得水样的磷酸盐浓度(mg/L)。 注意事项 磷钼蓝颜色在4 h内稳定。