金针菇增强免疫保健营养液的研制.docVIP

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金针菇增强免疫保健营养液的研制 1996年12I}=J 第1I)卷第4期总26辩} 北京联合』( .Journal0fBeijingUnkmUniversity n1996 VlI)N(】4SumNO26 ;金针菇强免疫保健营养液的研制77 王政刘忠信戴涟漪李鹏宇谢承宁王8方金宗濂 —— —— —~ (北京联合大学应用文理学院,北京,100083) A[摘要]用发酵’程的方法,将金针菇菌株在适宜条件下进行深层培养,箍得多糖含 量高达7.43g/L的金针菇发酵液.利用金针菇多糖具有增强机体免疫的生理特性,以 该发酵液为原料,制成金针菇增强免疫保健营养液,可为工业讫大生产提供科学依据 [关键词] [分类号] 金针菇(Famp;mmuliⅡvelutipes)又名朴菇,是可食用的高等担子菌.自1988年以来,北京联 合大学应用文理学院生物系对金针菇进行了全面的营养学评价J,发现它具有抗疲劳,抗衰 老,增强免疫和增智等功效.其中多糖成分有着良好的增强免疫的功能_3J.因而近些年国内外 对金针菇多糖的利用和开发异常活跃,金针菇多糖的产品更是国内外广泛研究的课题之一.但 金针菇多糖的发酵产品至今还不多见,尤其在饮料方面.为此.生产金针菇发酵液.制成风味鲜 美,保健作用广泛,特别是具有免疫增强作用的发酵饮料,具有宽广应用前景和重要经济价值. 1实验材料 -一-’. 菌株:选用中国农科院金针菇三明一号. 琼脂斜面培养基:20%马铃薯滤汁1000mL,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,维 生素Bl1mg,维生素B21mg,琼脂15g,pH=6. 液体培养基:玉米粉4%,硫酸镁02%,葡萄糖2%,磷酸二氢钾0.2%,用斜面菌种接种.接种量每瓶1~2cm2.静置24h后上摇床.转速为150r/min,在温度(25±1) ℃下培养5~7d下摇床. 2.3二级发酵培养 在500mL三角瓶中装液体培养基150mL.与一级发酵培养完全相同条件下按培养基10% 的量接种一级发酵培养菌液,培养5--7d下摇床. 2.4三级发酵培养 在2000mL三角瓶中装液体培养基500mL.与二级发酵培养完全相同条件下按培养基 10%的量接种二级发酵培养菌液.培养5--7d下摇床. 2.5金针菇发酵清液 将三级发酵培养发酵达终点的发酵液加热至80~85℃保持2~3min后灭活;加入抗氧化 剂V.过滤分离菌丝体(菌丝体可另制其它多糖产品).滤液于4000r/min离心;弃去沉淀物, 得到金针菇多糖发酵清液.以金针菇发酵清液为原料,可以调配成金针菇增强免疫保健饮料和 金针菇增强免疫口服液. 3金针菇发酵液的免疫效应 我们曾对金针菇发酵液的免疫功能进行过专门的研究,用上述发酵液饲喂12月龄雄性昆明 小鼠,饲喂量20mL/d?只,其中多糖含量110~140mg/d?只.35d后进行测定,结果见表1. 表1童针菇发酵液对小鼠免疫功能的影响 *HC50,50percenthemolysis 实验结果表明:金针菇发酵液能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率55.6%;提高吞噬指数 58.5%;增加胸腺重量85.7%;增加足趾厚度41.4%;提高溶血素值22.5%.可见,金针菇发酵 液有着良好的增强机体免疫的功能. 4小结与讨论 4.1菌种的选择 我们曾采用的金针菇菌种有三明一号,金针菇5611和金针菇5632.经过在多种不同的培 养基中培养比较,筛选,三明一号菌种生长速度快,菌丝球质量好,抗污染能力强.为此我们首选 农科院金针菇三明一号为本研究菌种. 第10卷第4期E政等:盎针菇增强免疫保健营养液的研制3l 4.2发酵过程中添加适当浓度吐温80对提高金针菇多糖产量作用明显 经多次试验表明,在常规培养基的基础上.加入一定浓度的吐温80:可以使甓酵清液中多糖 含量增加(表2).. 表2吐温80对发酵液多糖产量的影响 其中当吐温8O浓度增至0.1%时,发酵液中多糖产量达到最高.继续增加吐温80,其发酵 液中多糖产量反而降低.这一结果与某些报道颇为一致¨],可能是由于这种表面活性剂有利于 多糖产物不断向细胞外排放,从而增加发酵液中胞外多糖含量.但是,如果这种表面活性剂超越 一 定浓度时.又能制细胞自身的生长与代谢,因而也会影响多糖的产量.. 4.3发酵过程中摇床转速对菌丝体生长的量;响 实验结果表明,发酵过程中不同摇床转速,可获得不同效果的菌丝体. 当转速为120r/rain时.瓶内菌液较浑浊.培养基的利用不太好,且菌球不匀,个大,数少;当 转运150r/i,时何_内菌碴较清真.靖养基利用葺霉完拿,茸琏大小适宜数量较多j当转速 为200r/rain时,瓶内菌液较为清亮,菌球密稠偏小,数量多,但容易污染.因此我们选择摇床转 速150r/rain为发酵培养条件. 4.4发酵液中多糖含量与折光率的关

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