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* DNA(或RNA)是生命传递的载体 生命科学与技术学院 王文雅 * 肺炎链球菌转化实验 病毒重建实验 噬菌体感染实验 肺炎链球菌转化实验 * “基因”的化学本质是核酸 肺炎链球菌转化实验 肺炎链球菌:这是一种引起肺炎的细菌,当动物体被感染后,会产生相应的抗体来抵抗这些致病的细菌。 抗体与细菌的外鞘反应,而外鞘是由糖类分子组成的。 S(Smooth)型:菌落光滑,菌体有多糖类的荚膜,是有毒性的球形菌,可以使人患肺炎或小鼠患败血症。 R(Rough)型:菌落粗糙,菌体无多糖的荚膜,是无毒的球形菌。 毒 毒 毒 无毒 无毒 无毒 * “基因”的化学本质是核酸 无毒 毒 毒 毒 无毒 试 验 * 从第四组实验的小鼠尸体上分离出了有毒性的S型活细菌; “基因”的化学本质是核酸 毒 无毒 补充试验 * 存在有某种“转化因子”使细菌从R型转变为S型。 “基因”的化学本质是核酸 1、 2、 R型和S型细菌的差别就在细菌外的多糖荚膜上,所以致病的物质是多糖; * 已经被加热杀死的S型细菌中含有某种促成这一转化的活性物质——“转化因子”。 为何无毒性的R型活细菌能转化成有毒性的S型活细菌呢? “基因”的化学本质是核酸 思 考 ! * 进一步的提纯转化因子: ↗ 蛋白质+R型无毒细菌→小鼠存活 S型活细菌 → DNA +R 型无毒细菌 →小鼠死亡 ↘ 多糖 +R型无毒细菌→小鼠存活 并且发现DNA的纯度越高,转化就越有效。 “基因”的化学本质是核酸 深入研究 * * 由此可见,转化因子就是DNA。 “基因”的化学本质是核酸 结 论: * 人们仍不相信DNA是遗传物质,这是由于: (1)因为蛋白质分子量大,结构复杂,20种氨基酸的排列组合将是个天文数字,可作为一种遗传信息。而DNA分子量小,只含有4种不同的碱基,人们一度认为不同种的有机体的核酸只有微小的差别。 (3)即使转化因子的确是DNA,但也可能是DNA只是对荚膜形成起着直接的化学效应,而不是充当遗传信息的载体。 (2)认为转化试验中DNA并未能提得很纯,还附有其它的物质。 * 肺炎链球菌转化实验 病毒重建实验 噬菌体感染实验 “基因”的化学本质是核酸 * “基因”的化学本质是核酸 噬菌体感染试验 1952,Hershey Chase 用E.coli, phage T2做材料,利用同位素示踪法进行实验。 蛋白质只含S不含P,DNA只含P不含S,分别用含有35S、32P标记T2,感染E. coli 。 事件 原理 * “基因”的化学本质是核酸 如果35S进入大肠杆菌,那么……. 如果32P进入大肠杆菌,那么……. 设计思想 蛋白质是遗传物质。 核酸是遗传物质。 * “基因”的化学本质是核酸 吸附 10分钟后 用捣碎器使空壳脱离 离心 上清液中含75%放射性 沉淀中含25%放射性 沉淀细胞进一步培养后,可产生大量完整的子代噬菌体 用含35S-蛋白质(外壳)的噬菌体做感染试验 * “基因”的化学本质是核酸 吸附 10分钟后 用捣碎器使空壳脱离 离心 上清液中含15%放射性 沉淀中含85%放射性 沉淀细胞进一步培养后,可产生大量完整的子代噬菌体 用含32P -DNA(核心)的噬菌体做感染试验 * 蛋白质没有进入宿主细胞,进入宿主细胞的只有DNA,有力地证明了DNA是携带遗传信息的载体。 结 论: “基因”的化学本质是核酸 * 肺炎链球菌转化实验 病毒重建实验 噬菌体感染实验 “基因”的化学本质是核酸 * 当用由TMV的RNA和HRV的衣壳重建后的杂合病毒去感染烟草时,烟叶上出现的时典型的TMV病斑。反之,用HRV的RNA与TMV的衣壳进行重建时,也可获相同的结论。这就充分证明,在RNA病毒中,遗传物质基础也是核酸,只不过是RNA罢了。 “基因”的化学本质是核酸 病毒重组实验 将烟草花叶病毒拆成蛋白质和RNA(该病毒不含DNA),分别对烟草进行感染实验,结果发现只有RNA能感染烟草。 背 景 启 发 * 烟草花叶病毒Tobacco Mosaic Virus (TMV) “基因”的化学本质是核酸 * 烟草花叶病毒(TMV)的体外重建 “基因”的化学本质是核酸 病毒1抗血清 病毒2抗血清 分别提取病毒1的蛋白外壳和病毒2的核酸 免疫实验证明,杂种病毒的蛋白外壳来至于病毒1 免疫实验证明,杂种病毒后代的蛋白外壳来至于病毒2 遗传物质是核酸(RNA),而非蛋白质 1 2 * “基因”的化学本质是核酸 除DNA外,RNA也可以作为遗传物质。 结 论: * “基因”的化学本质是核酸 DNA(或RNA) 是生命传承的载体。 通过上述三个实验: *
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