药物分析-第十章 抗生素类药物的分析.ppt

取本品适量，精密称定，加水制成含0.65mg·ml-1的溶液，取4ml置10ml容量瓶中，加异丙醇2ml与邻苯二醛试液1.6ml，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置60℃水浴中加热15min，冷却，滤过，量取滤液10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图。另取庆大霉素标准品，同法测定。C组分的保留时间依次为：C1、C1α、C2α、C2。量取C1、C1α、C2α、C2的峰高，按峰面积归一化法计算： 第十章 抗生素类药物的分析 第三节 氨基糖苷类抗生素 三、特殊杂质检查及组分分析 规定：C1 应为25~50%，C1a应为15~40%，C2a +C2应为20~50%。 目前各国药典均采用微生物检定法测定本类药物的效价。本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。 第十章 抗生素类药物的分析 第三节 氨基糖苷类抗生素 四、含量测定 （一）化学结构 四环素类抗生素具有十二氢化并四苯基本结构，属于广谱抗菌药物。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 药物名称 R R1 R2 R3 四环素 金霉素 H Cl OH OH CH3 CH3 H H （二）性质 1．酸碱性与溶解度 本类抗生素结构中含有酚羟基、烯醇型羟基，显弱酸性，而二甲胺基又显弱碱性，故四环素类抗生素是两性化合物。与酸、碱均能成盐。 2．旋光性 四环素类抗生素分子结构中具有不对称碳原子，有旋光性，可用于定性、定量分析。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 （二）性质 3．紫外吸收和荧光性质 四环素类抗生素分子结构中具有共轭双键系统，在紫外区有吸收，在紫外照射下可产生荧光，它们的降解产物也具有荧光。 4．与金属离子络合 与金属离子Ca2+ 、Mg2+、Fe3+、Al3+生成有色配位化合物，并在pH3 ~ 7.5产生荧光。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 （二）性质 5．不稳定性 （1）差向异构化 弱酸性（pH2.0~6.0）溶液中，A环上手性C4构型的改变，发生差向异构化，形成差向四环素。 四环素和金霉素很易差向异构化，形成4-差向四环素、4-差向金霉素，他们的抗菌性极弱或完全消失。土霉素和强力霉素由于C5上的羟基和二甲胺基形成氢键，不易发生差向异构化。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 （二）性质 5．不稳定性 （2）酸性降解反应 在酸性（pH2）时，C环上C6上羟基易脱落与C5a上的氢生成水，在C6-C5a间形成双键。经重排使C环芳构化，生成脱水四环素类。 （3）碱性降解反应： 在碱性下，C环打开，生成无活性的具有内酯结构的异四环素；若强碱性下加热，可定量地转化为异四环素，后者具有强烈荧光，可荧光法测定。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 （一）呈色反应 四环素类抗生素遇H2SO4 、FeCl3均产生不同的颜色。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 二、鉴别试验 药物名称 H2SO4反应 FeCl3反应 四环素 金霉素 土霉素 多西环素 深紫色 蓝色 朱红色 黄色 红棕色 深褐色 橙褐色 褐色 （二）色谱法 HPLC、 TLC法可用于四环素类抗生素鉴别，中国药典（2005版）均有收载。 （三）光谱法 IR光谱法、UV光谱法也可四环素类抗生素鉴别，中国药典（2005版）均有收载。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 二、鉴别试验 （一）有关物质 引起毒性反应的主要物质为差向异构体、脱水物、差向脱水物质，统称为有关物质。主要有4-差向四环素、脱水四环素、差向脱水四环素、盐酸金霉素等。 第十章 抗生素类药物的分析 第四节 四环素类抗生素 三、特殊杂质的检查 （一）有关物质 中国药典2005版采用HPLC法检查盐酸四环素的有关物质：取本品适量，加0.01mol·L-1盐酸溶液溶解并分别制成含2