ELISA 原理、方法及操作细节.pptVIP

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ELISA 酶联免疫吸附试验;ELISA (酶联免疫吸附试验);简 介;酶和抗体或抗原结合后,既不改变抗体与抗原免疫学反应的特异性,也不影响酶本身的酶学活性,即在相应而合适的作用底物参与下,使基质水解而呈色,或使供氢体由无色的还原型变为有色的氧化型。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜和电子显微镜观察,也可用分光光度计加以测定。呈色反应显示了酶的存在,从而证明发生了相应的免疫反应。 所以,这是一种特异而敏感的技术,可以在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克,甚至纳米水平上对其进行定量。 ;基 本 原 理;方 法 类 型;1,双抗体夹心法:; ;2,间接法测定抗体;抗 原;3,竞 争 法;限量的的抗体;4,捕获法(反向间接法);针对IgM的第二抗体;具 体 步 骤;包 被;包 被 液 0.05M PH 9.6 磷酸盐缓冲液;PBST 洗 液;;;;??? 闭;封 闭 液;加标准样及样品;注 意;OPD 显 色;显 色 液;结 果 判 定;;应 用;所有血清学试验要注意;谢谢大家!

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