第六节蛋白质的性质及分离分析技术.pptVIP

* * * * * * * * * 沉降的概念 沉降速率：v=dx/dt 沉降常数与单位 应用： 沉降速度法测定分子量的原理； 梯度离心分离蛋白质（氯化铯）； 五、蛋白质的沉降作用 六、蛋白质的颜色反应 1. 双缩脲反应 2. 茚三酮反应 3. 考马斯亮蓝G250 4. 福林酚试剂反应 5. 黄色反应--芳香族氨基酸的特有反应 6. 米伦氏反应—酪氨酸的特有反应 7. 乙醛酸反应—色氨酸的特有反应 8. 坂口反应—精氨酸特有的反应 六、蛋白质的颜色反应 1. 双缩脲反应 两分子双缩脲与碱性硫酸铜作用，生成粉红色复合物 含有两个或两个以上肽键的化合物，能发生同样反应 肽键的反应，肽键越多颜色越深，粉红，紫红，蓝紫 受蛋白质特异性影响小 蛋白质定量测定；测定蛋白质水解程度 六、蛋白质的颜色反应 2. 茚三酮反应 灵敏度差。 3.考马斯亮蓝G-250 本身为棕色，与蛋白质反应呈蓝色 与蛋白的亲和力强，灵敏度高 11000微克/毫升 六、蛋白质的颜色反应 4. 福林酚试剂反应 酪氨酸、色氨酸的反应（还原反应） 福林试剂：磷钼酸-磷钨酸 与双缩脲法结合Lowry法 在碱性条件下，蛋白质与硫酸铜发生反应 蛋白质-铜络合物，将福林试剂还原，产生磷钼蓝和磷钨蓝混合物 灵敏度提高100倍 六、蛋白质的颜色反应 5. 黄色反应--芳香族氨基酸的特有反应 浓硝酸