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A液:0.2mol/L醋酸钠溶液,称NaAc·3H2O 54.44g,定容至2000mL....(1)将25mL牛奶加热至40℃.在搅拌下慢慢加入预热至40℃,pH4.8的醋酸缓冲液..._实验三 酪蛋白的制备与含量测定
一、实验目的
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。
二、实验原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为29g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的与原理,将牛乳的pH调至4.8时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。
三、实验材料、器材与试剂
1、材料
新鲜牛奶。
2、器材
(1)离心机;
(2)抽虑装置;
(3)精密pH试纸或酸度计;
(4)电炉;
(5)烧杯;
(6)温度计。
3、试剂
(1)95%乙醇;
(2)无水乙醚;
(3)0.2mol/LpH4.8醋酸-醋酸钠缓冲液3000mL。
(4)先配制A液与B液。
A液:0.2mol/L醋酸钠溶液,称NaAc·3H2O 54.44g,定容至2000mL.
B液:0.2mol/L醋酸溶液。
取A液1770mL,B液1230mL混合即得pH4.8的醋酸-醋酸钠缓冲液3000mL.
(5)乙醇-乙醚混合液:乙醇:乙醚=1:1(V/V).
四、实验操作
(1)将25mL牛奶加热至40℃.在搅拌下慢慢加入预热至40
(2)在沉淀中加入30mL乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液移至布氏漏斗中抽虑。用乙醇-乙醚混合液20ml洗沉淀2次。最后用乙醇20~30洗沉淀2次,抽干。
(3)将沉淀摊开在表面上,120℃烘干5~
(4)准确称量,计算含量和得率。
含量:酪蛋白g/100mL牛乳(g%)
得率:测得的含量/理论含量×100%
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