酪蛋白的制备与含量测定.docVIP

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A液:0.2mol/L醋酸钠溶液,称NaAc·3H2O 54.44g,定容至2000mL....(1)将25mL牛奶加热至40℃.在搅拌下慢慢加入预热至40℃,pH4.8的醋酸缓冲液..._实验三 酪蛋白的制备与含量测定 一、实验目的 学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。 二、实验原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为29g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的与原理,将牛乳的pH调至4.8时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。 三、实验材料、器材与试剂 1、材料 新鲜牛奶。 2、器材 (1)离心机; (2)抽虑装置; (3)精密pH试纸或酸度计; (4)电炉; (5)烧杯; (6)温度计。 3、试剂 (1)95%乙醇; (2)无水乙醚; (3)0.2mol/LpH4.8醋酸-醋酸钠缓冲液3000mL。 (4)先配制A液与B液。 A液:0.2mol/L醋酸钠溶液,称NaAc·3H2O 54.44g,定容至2000mL. B液:0.2mol/L醋酸溶液。 取A液1770mL,B液1230mL混合即得pH4.8的醋酸-醋酸钠缓冲液3000mL. (5)乙醇-乙醚混合液:乙醇:乙醚=1:1(V/V). 四、实验操作 (1)将25mL牛奶加热至40℃.在搅拌下慢慢加入预热至40 (2)在沉淀中加入30mL乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液移至布氏漏斗中抽虑。用乙醇-乙醚混合液20ml洗沉淀2次。最后用乙醇20~30洗沉淀2次,抽干。 (3)将沉淀摊开在表面上,120℃烘干5~ (4)准确称量,计算含量和得率。 含量:酪蛋白g/100mL牛乳(g%) 得率:测得的含量/理论含量×100%

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