麦角固醇高产菌株的构建及其培养优化条件的研究-微生物学报-中国.PDFVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ’/ ’ IJ;K’/JK’ 年 月 ’!!! ’ !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( L4CM4 ’!!! - 12 = !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 麦角固醇高产菌株的构建及其培养优化条件的研究 张博润 何秀萍 铁翠娟 刘玉方 （中国科学院微生物研究所 北京 ） ’%%%*% 摘 要 通过初筛、单倍体分离、诱变及酵母菌种间原生质体融合技术构建了 株麦角固醇 ( 产量明显提高的优良菌株 和 。并对 的培养优化条件进行了研究。 +,-#(’ +,-#(! +,-#(’ 结果表明在优化的实验条件下 的生物量及麦角固醇含量的综合值分别为原始亲株 +,-#(’ 和 的 和 倍。经遗传稳定性分析，没有发现标记基因的分离现象，从 +,(() +,’*% ’./0 ’.// 而证明获得的融合菌株是遗传稳定的，是具有一定实际应用价值的麦角固醇高产菌株。 关键词 酵母菌，原生质体融合，麦角固醇，生物量 分类号 文献标识码 文章编号 （ ） 12!(%.’ 3 ’%%%#%’’!!!%’#%%0#/’ 目前麦角固醇的生产菌种主要是酵母菌，国外对麦角固醇产生菌及其合成代谢途径 ［ ］ 等进行了比较深入的研究’! 。国内从五、六十年代开始研究从酵母菌中提取麦角固 醇，但普遍存在的问题是菌种麦角固醇含量低，提取率也较低。近年来有关单位对麦角固 ［ ］ 醇高产菌株选育及其发酵条件进行了研究0!* 。本文是在原有工作基础上利用原生质 体融合技术，将细胞生物量高的酵母菌单倍体与麦角固醇含量高的单倍体融合构建麦角 固醇产量和细胞生物量均有所提高的高产菌株，并对其发酵条件进行了研究。 ! 材料和方法 !! 实验菌株 以本实验室收集保藏的 株不同种属的醇母菌为试验出发菌株，统一编号为 (’ +,’ 至 。 （）及 （）为本实验室保藏的标准交配型菌株。 +,(’ 304 56#(’ !# 培养基及培养条件 ［］ ! 培养基， 生孢培养基， 培养基及 选择培养基 。发酵培养 +,78 9:$;4 +? +? = 基组成由摇瓶试验确定。将待测菌株在+,78斜面上活化，接一环于+,78液体培养 基， 、 ／ 培养