蛋白质与酶的重点知识及其习题.docxVIP

生化重点知识及其习题（部分难题）： 一．氨基酸与蛋白质 构成蛋白质的基本单位是 蛋白质在酸、碱或酶的作用下，可逐步降解为氨基酸，组成蛋白质的氨基酸常见的有20种，成千上万的不同蛋白质实际上就是氨基酸的种类、数目及排列顺序不同。 构成蛋白质的20种氨基酸均为α—氨基酸，每个氨基酸的α—碳原子上都连接一个羧基和一个氨基。20种氨基酸结构的差别就在于它们的R基团结构的不同（会写结构通式）。 根据20种氨基酸侧链R基团的极性，可将其分为四大类：非极性R基氨基酸（8种）；不带电荷的极性R基氨基酸（7种），带负电荷的R基氨基酸（2种）；带正电荷的R基氨基酸（3种）。 氨基酸的性质：①氨基酸的两性解离性质及等电点（由于氨基酸含有酸性的羧基和碱性的氨基，所以既是酸又是碱，是两性电解质。有些氨基酸的侧链还含有可解离的基团，其带电状况取决于它们的解离常数—pk值。由于不同氨基酸所带的可解离基团不同，所以等电点不同。氨基酸在水溶液中是以兼性离子状态—偶极离子存在的，在不同的PH溶液中带不同的电荷。）②氨基酸的立体异构（除甘氨酸外，其他氨基酸都有不对称碳原子，所以具有D—型和L—型两种构型，具有旋光性。天然蛋白质中存在的氨基酸都是L—型。）③氨基酸的紫外吸收特性：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸具有紫外吸收特性，在280nm处有最大吸收值。大多数蛋白质都具有这些氨基酸，所以蛋白质在280nm处也有特征吸收，这是紫外分光光度法定量测定蛋白质的基础。④氨基酸的化学性质：较重要的化学反应有：茚三酮反应，除脯氨酸外，所有的α—氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应，生成蓝紫色化合物，脯氨酸与茚三酮生成黄色化合物；α—氨基酸与2,4—二硝基氟苯作用；与苯异硫氰酸酯作用。 肽：肽、二肽的概念。寡肽——少于10个氨基酸的肽；多肽——由10个以上氨基酸组成的肽。 肽的重要性质：含有两个以上肽键的化合物具有双缩脲反应。多肽含有多个肽键，因此具有强烈的双缩脲反应。某些寡肽具有重要的生理活性，如谷胱甘肽（GSH）、脑啡肽、催产素、加压素等。 肽的结构：多肽的主链结构是相同，不同的多肽就是氨基酸的组成、排列顺序和数目不一样。具生命活性的高分子多肽就是蛋白质，大部分肽是线性结构，少部分多肽呈环状结构。 蛋白质的结构（四个），一般将二级结构、三级、四级结构称为三维构象或高级结构。 一级结构内容包括蛋白质分子中的肽键、肽链、氨基酸的排列顺序和二硫键的位置。肽键是蛋白质中氨基酸之间的主要连接方式，即由一个氨基酸的α—氨基和另一个氨基酸的α—羧基之间脱去一分子水相互连接。肽键具有部分双键的性质，所以整个肽单位是一个刚性的平面结构。 掌握一些概念：一级、二级结构、三级、四级结构；超二级结构、结构域 维持蛋白质空间结构的作用力主要是氢键、离子键、疏水作用力等非共价键，又称次级键。在某些蛋白质中还有二硫键，其在维持蛋白质构象方面也起着重要作用。 蛋白质的重要性质及蛋白质的分离纯化： （1）蛋白质的两性解离性质及其等电点：蛋白质的酸碱性质取决于肽链上的可解离的R基团。不同蛋白质所含有的氨基酸的种类、数目不同，所以具有不同的等电点。当蛋白质所处环境的PH大于PI时，蛋白质分子带负电荷；小于，带正电荷；两者相等，蛋白质所带净电荷为零，此时溶解度最小。 （2）蛋白质胶体性质和它的沉淀分离：蛋白质分子表面带有许多亲水基团，是蛋白质成为亲水的胶体溶液。蛋白质颗粒周围的水化膜（水化层）以及非等电状态时蛋白质颗粒所带的同性电荷的互相排斥是使蛋白质胶体系统稳定的主要因素。当这些稳定因素被破坏时，蛋白质会产生沉淀。盐析的概念。但是盐析并不引起蛋白质的变性，可用于蛋白质的分离。 （3）蛋白质的变性和复性：蛋白质的变性的概念。变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而造成空间构象的解体，但未涉及共价键的断裂。 （4）蛋白质的分离纯化方法：主要有盐析、离子交换层析、分子筛层析、等电点沉淀、选择性吸附层析和亲和层析等。 12、构成蛋白质的氨基酸主要有20种，不同氨基酸之间的差异就是R基团不同，它们的共同特征是：（1）除Pro外，都属于α—氨基酸，Pro为α—亚氨基酸（2）都属于L—氨基酸（3）除Gly外，都具有旋光性（4）为两性电解质。 部分习题： 1、根据各种氨基酸的结构班的，哪几种氨基酸在紫外区可能有特征吸收峰？ 答：具有芳香族结构和共轭双键结构的化合物在近紫外区（200—400nm）表现出特征吸收。根据氨基酸的结果判断，苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸都有特征性的吸收峰（苯丙氨酸257nm、酪氨酸275nm、色氨酸280nm），组氨酸具有共轭双键结构，也应有光吸收。在蛋白质的紫外吸收光谱中，主要以酪氨酸为主，因为色氨酸在蛋白质中所占的比例较低。 2、有机溶剂使蛋白质变性，主要是通过破坏离子键，从而使蛋白质的空间构象发生变