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第十三章 微生态调节剂（一）益生菌 益生菌的作用机制 生态平衡理论 生物拮抗理论 生物夺氧学说 免疫赋活作用 营养作用 三流运转学说 三流运转学说 “三流”即指能量流、物质流及信息流（基因流）。 能量流即指正常微生物群与宿主保持着能量交换和运转的关系。微生态的能量流是宿主与微生物之间，正常微生物与正常微生物之间所存在着能源交换的关系。 物质流即正常菌群的能源与物质均依赖于宿主，微生态系统存在着降解与合成代谢。降解与合成是微生物代谢中的必然途径。 基因流即正常微生物之间有着广泛的基因（DNA）交换，如耐药因子(R因子)、产毒因子等都可在正常微生物之间通过物质的传递进行交换。 三流运转学说 益生菌作为非特异的免疫调节因子，可维持黏膜结构的完整，促进机体吞噬细胞的吞噬活力和促进B淋巴细胞产生抗体的能力，抑制腐败菌和致病的生长，降解肠道有毒物质的产生，促进肠道蠕动，有利于排泄，使整个微生态系统保持最佳状态之中，保证微生态系统的能量流、物质流和基因流“三流”的正常运转。 双歧杆菌菌属(Bifidobacterium) 一、双歧杆菌的生物学特性 双歧杆菌是革兰氏阳性、多形态杆菌。菌体形状呈Y字形、V字形等形态，其典型的特征是有分叉的杆菌，专性厌氧，不形成芽孢，最适生长温度37℃-41℃。 对糖类分解代谢途径不同于乳酸菌的同型或异型发酵，而是经由特殊的“双歧支路”，对葡萄糖代谢，最后生成乙酸和乳酸，二者摩尔比为1.5：1 双歧杆菌主要分布在结肠粘膜表面。新生儿出生后不久，肠道内首先出现以大肠杆菌为首的需氧及兼性厌氧菌的优势菌群，这些菌在肠道内消耗了氧气，降低了肠道局部的氧化还原电势（Eh），促进了双歧杆菌这类厌氧菌在肠道的定植。一般在出生后的6-8天，肠道内即建立起以双歧杆菌占绝对优势的菌群。 其他菌属 明串珠菌属（Leuconostoc）肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）。 片球菌属（Pediococcus）乳酸片球菌（Pediococcus acidilaxtici）、啤酒片球菌（P.cerecisiae）和戊糖片球菌（P.pentosaceus）。 乳球菌属（Lactococcus）乳酸乳球菌（Lactococcus lactis） 丙酸杆菌属（Propionibacterrium）谢氏丙酸杆菌(P.shermanii)和费氏丙酸杆菌(P.freudenreichii)可作为饲料添加剂益生菌使用。 拟杆菌属（Bacteroides）猪拟杆菌（B.suis）、多毛拟杆菌(B.capillosus)、瘤胃生拟杆菌(B.ruminocola)、嗜淀粉拟杆菌(B.amylophilus) 酵母菌(Yeasts)啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae） 博拉迪酵母菌（Saccharomyces boulardii）和假丝酵母（Candide pintotopesii）。 真菌(Mycete)曲霉菌属(Aspergillus)的黑曲霉(A. niger)和米曲霉(A. oryzae)两种。 益生菌的筛选标准 （一） 益生菌菌株的分离和选种 最好是与原宿主、原生境、原微生态系、原微群落甚至原微种群相适应的菌种最理想。尽量采用通常被认为是安全的菌种。 益生菌菌株的活性和活存能力 在菌体活存率为1%～10%的情况下，室温条件下保存2～3个月，4℃条件下保存少于5～6个月者，不易做益生菌的菌种。 对菌株生产性能的考察 对干燥条件、制粒操作、抗生素、基质耐受性考察 益生菌的筛选标准（二） 益生菌对体内环境耐受能力 包括耐受胃酸、耐受胆汁、 对酶的耐受 黏附和定植能力的研究 黏附素的应用 抗微生物能力的研究 筛选高产抗菌活性物质和产酸能力强的菌株作为益生菌生产菌株，对于它们能在肠道种活的优势菌群地位，有效抑制病源菌的生长繁殖具有重要意义。 益生菌的基因改造 插入黏附基因、敲除产乳酸基因等 益生菌制剂的质量要求（一） 对菌种的要求 表型和基因型的稳定性；抗菌物质的产生；抗生素耐受性；对肠内病原体、腐败性微生物的抑制能力以及免疫原性。 对益生菌功效要求的标准 在酸和胆汁中的稳定性 黏附稳定性 在生产和贮藏过程中的存活率 对制品的质量控制要点 1、鉴别 2、外观性状 3、装量差异（或重量差异） 4、崩解时限（胶囊或片剂） 5、粒度和溶化性检查（颗粒剂、散剂） 6、干燥失重 7、活菌数测定或活性测定 8、杂菌检查 9、异常毒性试验 益生菌的安全性 传统益生菌菌株的安全性，已经过长时期的实践所证实。 已偶尔在各种类型的感染病灶中分离到乳杆菌属、明串珠菌属、片球菌属、肠球菌属和双歧杆菌属的一些种。 对益生菌致病性和感染力的研究 乳杆菌和双歧杆菌一直被认为不具有感染