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(2)过程③目的基因和运载体连接需要在________ 的催化 下完成。 (3)取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的________ 中 培养一段时间后,才可进行体外受精。 (4)图中过程⑥称为________,为使代孕母鼠与供体母鼠生 殖器官的生理变化相同,此前需对代孕母鼠做__________处理。 (5)采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的 转基因小鼠,若选用囊胚期的胚胎,操作过程需要特别注意的 问题是_____________________________________________。 (6)若通过上述操作获得的蛋白质,不完全符合人类的需 要,则需要通过__________或基因合成,对现有蛋白质进行改 造。 解析:(1)图示为某转基因小鼠培育过程示意图,其中①表 示注射促性腺激素,使供体母鼠超数排卵;②表示同期发情处 理;③表示基因表达载体的构建;④表示将目的基因导入受体 细胞;⑤表示早期胚胎培养过程;⑥表示胚胎移植过程。(2)③ 为基因表达载体的构建过程,该过程需用 DNA 连接酶将目的 基因和运载体连接形成重组 DNA。(3)取自公鼠附睾中的精子进 行获能处理才可进行体外受精,即将精子放入人工配置的获能 液中培养一段时间。(4)图中⑥为胚胎移植;胚胎移植时,需对 供受体进行同期发情处理,以保证胚胎移植进入相同的生理环 境。(5)对囊胚期的胚胎进行分割时,应注意对内细胞团进行均 等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。(6)蛋白 质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基 础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行基因改造, 或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需要。 答案:(1)促性腺激素 超数排卵 (2)DNA 连接酶 (3)获能液 (4)胚胎移植 同期发情 (5)对内细胞团均等分割 (6)基因修饰 5.下图为绿色荧光小鼠制备流程图, Gfp 是绿色荧光蛋白 基因,请分析回答下列问题: (1)构建表达载体需要的酶是______________________ ____________________,表达载体包含绿色荧光蛋白基因 Gfp、 ____________、__________、终止子和复制原点等。 (2)图中载体上的 Neo 基因是一种抗生素抗性基因,图中步 骤③所用的 G418 是一种抗生素(对细胞有毒害作用),添加 G418 的目的是____________________________________________。 (3)图中所用的胚胎干细胞来自于_____________________ ______________。 (4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的__________ 位 置,图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素进行_________ _______处理。 (5) 可以使用__________________ 方法在蛋白质水平上鉴 定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。 解析:(1)基因工程中常用限制性核酸内切酶切割目的基因 和运载体,后用 DNA 连接酶连接目的基因和运载体。基因表 达载体包括启动子、标记基因、目的基因、复制原点、终止子 等。(2)Neo 基因是一种抗生素抗性基因,而 G418 是一种抗生 素,该物质对细胞有毒害作用,所以培养液中添加 G418 可将 导入目的基因的胚胎干细胞筛选出来。(3)胚胎干细胞来自早期 胚胎或原始性腺,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向 分化的特性。(4)囊胚时期的内细胞团将发育成幼体的各种组织 和器官,所以应将含目的基因的胚胎干细胞注射入囊胚的内细 胞团中。胚胎移植前要对供体和受体进行同期发情处理,以使 供体和受体具有相同的生理状态。(5)在分子水平鉴定目的基因 是否表达产生相应蛋白质,可采用抗原—抗体杂交方法。 标记基因 启 动子 答案:(1)限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶 (2)筛选出导入目的基因的胚胎干细胞 (3)早期胚胎或原始性腺 (4)内细胞团 同期发情 (5)抗原—抗体杂交 6.随着科学技术的发展,人们可以根据需求来改造生物的 性状。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,据图 回答问题: (1)在此过程中涉及的细胞水平的现代生物技术手段主要 有________________________。 (2)图中①经过酶处理可以得到③,从③到④的过程中一般 利用去核后未受精的卵细胞作为受体,而不用普通的体细胞, 原因是________________________________________________ ______________________
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