高中生物必背实验：dna的粗提取与鉴定.ppt

植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 思考：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 思考：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果 （三）去除滤液中的杂质 方案一: （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤 （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤 （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 2．析出含DNA黏稠物： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤 （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤 2．析出含DNA黏稠物： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤 （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤 2．析出含DNA黏稠物： 3．将DNA的黏稠物再溶解： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤 （三）去除滤液中的杂质 方案一: 1．溶解细胞核内的DNA： 加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤 2．析出含DNA黏稠物： 3．将DNA的黏稠物再溶解： 加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态 （三）去除滤液中的杂质 方案二: （三）去除滤液中的杂质 方案二: 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 （三）去除滤液中的杂质 方案二: 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三: （三）去除滤液中的杂质 方案二: 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三: 将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保10~15min,注意严格控制温度范围。 （三）去除滤液中的杂质 方案二: 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三: 将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保10~15min,注意严格控制温度范围。 讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？ （三）去除滤液中的杂质 方案二: 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min, 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三: 将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保10~15min,注意严格控制温度范围。 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开； 方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而