高效铬还原菌Bacillus cereus SJ1和Lysinibacillus fusiformis ZC1的铬还原特性和全基因组序列研究.docxVIP

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2019-09-03 发布于福建
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高效铬还原菌Bacillus cereus SJ1和Lysinibacillus fusiformis ZC1的铬还原特性和全基因组序列研究.docx

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高效铬还原菌肋c舭cd它琊sJl和伽f玎西口cfff缸加扣册括zcl的铬还原特性和全基因组序列分析高效铬还原菌肋c舭cd它琊sJl和伽f玎西口cfff缸加扣册括zcl的铬还原特性和全基因组序列分析摘要铬及其化合物广泛应用于电镀、制革、纺织、防腐等工业生产，随后工业废水废渣的肆意排放造成了环境的严重污染。利用具有铬抗性及还原性的微生物把高毒的铬m)转化为低毒的铬(III)为铬解毒及生物降解提供了一个经济有效的污染治理手段。然而目前高效的铬(VI)还原菌很少，而且关于微生物铬抗性及还原性相关基因功能的认识也很有限。我们从电镀废水中分离了两株铬(VI)高抗还原菌，占口cf跏ce愆淞S儿和句咨砌f6口c讲淞丘s咖瑚豇ZCl，并对其进行了铬ⅣI)还原特性的研究。SJl和zCl菌的铬(VI)最小抑制浓度(MIC)分别为30 mM和60 InM。SJl的铬(VI)抗性为诱导性表达，而ZCl菌的铬(VI)抗性为组成型表达。l n1M的K2C幻4被占．钟陀嬲S儿还原需57小时，而被三．加的删西ZCl还原只需12小时。对S儿全基因组分析发现，B．ce嘲惦SJl中含有一个铬转运操纵子c矗儿41，两个铬转运相关基因c厅一。除此之外，一个编码偶氮还原酶(azoreductase)的基因此DR 和四个编码硝基还原酶(ni仃oreductase)的基因力f坎也在其基因组中，这些基因都可能与铬还原相关。通过RT-PCR发现，相邻的两个基因c^删1的表达都受到铬(VI) 的诱导，而另外两个c五一则为组成型表达。铬还原相关基因无论是从基因水平还是从表型上都是组成型表达。cJil删l基因上游出现的编码解离酶(resolvaSe)的基因，下游的砷抗性相关操纵子以及编码Th7类的转运蛋白ABBCCCD预示了B．ce陀螂 SJl基因水平转移的发生。这种基因水平转移可能有利于菌体对铬污染环境的适应。本研究发现c办硝l有一个受到铬(VI)调控的蛋白基因cJi2玎。通过与基因文库中多种类似的且与铬转运基因c^刊形成一个操纵子的调控子ChrI进行比对发现，两种氨基酸，赖氨酸(K)和精氨酸(R)，在所有比对的序列中高度保守。这两种氨基酸生理学条件下带正电荷，很有可能是带负电荷的c幻42。基团识别和结合的位点。虽然 ChrI的功能没有得到证实，但ChrI是首次提出的与铬(VI)还原调控相关的潜在调控子。三．如咖册西ZCl是至今为止已经报道的铬(VI)还原效率最高的细菌。厶加咖朋括ZCl的铬(VI)还原效率受到乙酸钠和NADH促进。ZCl还具有多种重(类) 华中农业大学2010届博士研究生学位论文金属抗性。全基因组分析发现，ZCl菌含有多种预定的铬抗性基因、铬还原基因和华中农业大学2010届博士研究生学位论文金属抗性。全基因组分析发现，ZCl菌含有多种预定的铬抗性基因、铬还原基因和 (类)金属抗性基因。无论是从表型上还是从基因水平L．加咖删西ZCl的铬抗性都是组成型表达。此外，可能与铬还原相关的两个基因刀豇尺和埘矿也为组成型表达。其高效的铬还原效率很有可能归因于大量NADH依赖性的铬还原酶通过组成型表达的解毒作用，从而使得该菌能在如此恶劣的环境下代谢并存活。本论文的研究结果在铬(VI)抗性及还原性细菌资源的开发、细菌铬(VI)原性特性、细菌铬(VI)抗性调控和环境适应性的分子基础等方面都具有一定的理论价值和创新性。关键词：蜡状芽孢杆菌；梭形芽胞杆菌；铬还原；铬抗性；全基因序列 Ⅱ 高效铬还原菌肋c玎如西理陀埘SJl和上筘加西粥讹心加咖册妇zcl的铬还原特性和全基因组序列分析AB 高效铬还原菌肋c玎如西理陀埘SJl和上筘加西粥讹心加咖册妇zcl的铬还原特性和全基因组序列分析 AB STRACT The wide use of chromi啪(Cr)觚d its compound in elec仃oplating，leamer tanning， textile and preseⅣation indus仃ies wim subsequent sewage disposal causes severc co此吼ination of 910bal soil—water syste眦．Bio仃ansfo锄ation of C小，I)to less-toxic C“III)by chromate·resistaIlt and reducing bacte渤haus o能red an ecolo西cal扣1d econ0IIlical 0ption for chromate detoxification and bioremediation．However，just a f．ew higllly emcient chromate—