第八章非水酶催化.pptVIP

第8章：酶的非水相催化 Enzymatic catalysis in Non-aqueous system Contents of chapter 8 第一节酶非水相催化反应的研究概况 Klibanov 的实验 酶非水相催化的几种类型 气相介质中的酶催化 酶在气相介质中进行的催化反应。适用于底物是气体或者能够转化为气体的物质的酶催化反应。 由于气体介质的密度低，扩散容易，因此酶在气相中的催化作用与在水溶液中的催化作用有明显的不同特点。 超临界介质中的酶催化 酶在超临界流体中进行的催化反应。超临界流体是指温度和压力超过某物质超临界点的流体。 离子液介质中的酶催化 酶在离子液中进行的催化作用。离子液（ionic liquids）是由有机阳离子与有机（无机）阴离子构成的在室温条件下呈液态的低熔点盐类，挥发性低、稳定性好。酶在离子液中的催化作用具有良好的稳定性和区域选择性、立体选择性、键选择性等显著特点。 热点：介质工程、溶剂工程 改变反应介质来改变酶催化反应的选择性，从而达到人为的改变和控制酶的立体专一性。 有机相酶反应的优点： 1． 有利于疏水性底物的反应，能催化在水中不能进行 的反应 2． 可提高酶的热稳定性. 3． 可改变反应平衡移动方向 4. 可控制底物专一性 5. 酶和产物易于回收。 6. 可避免微生物污染。 第二节：水和有机溶剂对非水相介质中酶催化的影响 一、 有机介质反应体系 微水介质体系（研究最多，应用最广泛） 用非极性有机溶剂取代所有的大量水，使固体酶悬浮在有机相中。但仍然含有必需的结合水以保持酶的催化活性(含水量一般小于2%)。 酶的状态可以是结晶态、冻干状态、沉淀状态，或者吸附在固体载体表面上。 与水互溶的有机溶剂组成的均一体系 有机溶剂与水形成均匀的单相溶液体系。酶、底物和产物都能溶解在这种体系中。 与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系 由含有溶解酶的水相和一个非极性的有机溶剂(高脂溶性)相所组成的两相体系。 （正）胶束体系 胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与水不相溶的有机溶剂，加入表面活性剂后形成的水包油的微小液滴。表面活性剂的极性端朝外，非极性端朝内，有机溶剂包在液滴内部。反应时，酶在胶束外面的水溶液中，疏水性的底物或产物在胶束内部。反应在胶束的两相界面中进行。 反胶束体系 又称反胶团，是指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有少量的水溶液，加入表面活性剂后形成的油包水的微小液滴。表面活性剂的极性端朝内，非极性端朝外，水溶液包在胶束内部。反应时，酶分子在反胶束内部的水溶液中，疏水性底物或产物在反胶束外部，催化反应在两相的界面中进行。 二、水对有机介质中酶催化的影响 酶都溶于水，只有在一定量的水存在的条件下，酶分子才能进行催化反应。所以酶在有机介质中进行催化反应时，水是不可缺少的成分之一。有机介质中的水含量多少对酶的空间构象、酶的催化活性、酶的稳定性、酶的催化反应速度等都有密切关系，水还与酶催化作用的底物和反应产物的溶解度有关。 酶分子只有在空间构象完整的状态下，才具有催化功能。在无水的条件下，酶的空间构象被破坏，酶将变性失活。故此，酶分子需要一层水化层，以维持其完整的空间构象。维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量称为必需水（essential water）。 有机介质中水的含量对酶催化反应速度有显著影响。存在最适水含量。 1、水对酶分子空间构象的影响 不同的酶，所要求的必需水的量差别很大。 在辛烷中糜蛋白酶催化仅需吸附50个水分子，而脂肪酶仅需几个水分子就可显示出活性。 同一种酶在不同有机溶剂中最适反应需水量不同；溶剂疏水性越强，需水量越少。 酶活最大时——蛋白质结构的动力学刚性和热力学稳定性（柔性）之间达到最佳平衡点。 “刚柔并济” 2、水对酶促反应速度的影响 有机介质中水的含量对酶催化反应速度有显著的影响； 最适含水量：催化反应速度达到最大时的水含量。 在实际应用时应当根据实际情况。 3、水活度 水活度（water activity)： 指特定的温度和压力条件下，反应体系中水的摩尔分数 Xw与水活度系数гw的乘积： а w =гw* Xw 水活度系数гw是溶剂疏水性的函数，溶剂疏水性越大， гw越大。 а w 是一个强质性质的物理量，在平衡状态时，反应体系中各组分（酶、溶剂、底物和产物）的а w 是相同的。 研究水活度的意义： 1 最佳水活度与溶剂的极性几乎无关，大约在0.55左右 2 可以排除溶剂对最适含水量的影响 3 水活度可由反应体系中水的蒸汽压除以在相同条件下纯水的蒸汽压而测得。 二、反应体系中有机溶剂对酶催化反应的影响 常用的有机溶剂有辛烷，正己烷，苯，