血清尿酸测定.doc

血清尿酸测定 实验原理 使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。 尿酸酶 尿酸 + H2O + O2 尿囊素 + CO2 + H2O2 过氧化物酶 TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H2O2 醌亚胺 + 3H2O 2. 标本： 2.1 病人准备： 12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。 3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂 威特曼尿酸测定试剂盒。 试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂 6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析 10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。 11. 计算方法：以TruCal U复合校准品尿酸校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以?mol/L报告。 12. 参考值范围：（?mol/L） 血清/血浆 女性 男性 成人 137～363 214～488 儿童0～5天 113～470 113～470 1～4岁 101～303 131～470 5～11岁 178～381 178～381 12～14岁 190～363 190～440 15～17岁 190～381 268～482 尿液 ≤4.76mmol/d（正常饮食） ≤3.57mmol/d（低嘌呤饮食） 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 13. 临床意义：尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸升高的原因还有：排泄功能下降的肾脏疾病，饥饿，滥用药物，过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见，其与罕见的遗传代谢紊乱有关。 14. 操作性能 14.1 线性范围：17.8～1190?mol/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 批内精密度 n=20 (?mol/L) s (?mol/L) CV (%) 批间精密度 n=20 (?mol/L) s (?mol/L) CV (%) 样品1 163.6 2.5 1.55 样品1 159.4 2.4 1.52 样品2 318.2 4.0 0.74 样品2 311.1 5.1 1.63 样品3 600.7 4.6 0.77 样品3 593.6 6.3 1.06 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对70个样品进行UA检测，将检测结果作