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枸盐酸盐利用试验标准操作规程
1.目的
规范枸盐酸盐利用试验标准操作规程。
2.原理
在枸盐酸盐培养基中,细菌能利用的碳源只有枸盐酸盐。当某种细菌能利用枸盐酸盐时,可将其分解为碳酸钠,使培养基变碱性,PH指示剂溴麝香草酚蓝由淡绿色变为深蓝色。
3.试剂
3.1 枸盐酸盐培养基成分
硫酸镁 0.2g 磷酸二氢铵 1g
磷酸二氢钾 1g 枸盐酸纳 2g
氯化钠 5g 琼脂 15g
2g/L溴麝香草酚蓝溶液 4ml 蒸馏水 1000ml
3.2 制备 加热溶解,校正PH至7.0,分装试管,每管3ml,置115℃灭菌15分钟,冰箱中备用。
4.质控
大肠埃希菌ACTT 25922为绿色,阴性;肺炎克雷伯菌ACTT 13883为蓝色,阳性。
5.操作步骤
将待检菌接种至枸盐酸盐培养基斜面,35℃孵育1~7日。
6.结果判断
培养基由淡绿色变为深蓝色为阳性。
7.注意事项
接种时菌量应适宜,过少可发生假阴性,接种时过量可导致假阳性。
8.临床意义
有助于于鉴别肠杆菌科细菌。
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