碱性蛋白胨水配制标准操作规程.doc

碱性蛋白胨水配制标准操作规程 1．目的 规范碱性蛋白胨水配制标准操作规程，保证培养基质量。 2．原理 在pH8.0～9.0环境中，霍乱弧菌能较好地生长繁殖，而其他大部分细菌在此环境中生长受抑制，因此霍乱弧菌在次培养基上生长占优势，为进一步分离培养提供有利条件。 3．用途 主要用于霍乱弧菌增菌培养用。 4．配方 蛋白胨10g、氯化钠20g、蒸馏水1000ml，pH8.4～8.8。 5.操作步骤 将上述成分混合加热溶解，调整pH至8.4～8.8，煮沸，稍冷后，分装试管，每支8ml，121℃高压灭菌15分钟，冷藏备用。 6.储存条件 2～8℃冰箱。 7.有效期 实验室自行规定，确保培养基质量。 8. 质量控制 8.1 质控频度 每次新配制时做质控 8.2 质控方法及结果见表5-23. 表5-23 配制碱性蛋白胨水质量控制方法及结果 试验 方法 结果 无菌试验 生长试验 平行试验 100支抽检5%，100支随机取10块，35℃培养18～24小时，观察有无细菌生长（若有细菌生长，则营养肉汤变浑浊） 非O1群弧菌（质控菌株），35℃孵育6h 大肠埃希菌ATCC25922，35℃孵育6h 副溶血弧菌（质控菌株），35℃孵育6h 做质控时，取新旧批号的培养基同时做 无细菌生长 生长良好 生长抑制 生长良好 9.注意事项 蒸馏水配制时，由于蒸馏水pH偏低，故pH要重新测定。