斑节对虾TRIAP1基因的克隆、表达分析以及调控其表达的.PDFVIP

第 15 卷第 4 期 南    方    水    产    科    学 Vol.15，No.4 2 0 1 9 年 8 月 South  China  Fisheries  Science Aug. ，2019   doi: 10.12131 文章编号： 2095 − 0780 − （2019）04 − 0088 − 11   斑节对虾TRIAP1 基因的克隆、表达分析以及调控其表达的 miRNAs 的筛选 1, 2 1 1 1 1 1, 3 刘恩瑞 ，赵    超 ，王鹏飞，范嗣刚，闫路路，邱丽华 （1. 中国水产科学研究院南海水产研究所，农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室，广东 广州 510300； 2. 上海海 洋大学，水产科学国家级实验教学示范中心，上海 201306； 3. 农业农村部水生动物基因组学重点实验室，北京 100141） 摘要： 凋亡抑制因子 1 (tumor protein p53 regulated inhibitor of apoptosis 1, TRIAP1)可以通过抑制细胞凋亡参与生 物体内应激反应。为探究TRIAP1基因及调控其表达的miRNAs在斑节对虾 (Penaeus monodon) 应对哈氏弧菌 (Vibrio harveyi)刺激时的表达调控情况，该研究通过RACE技术获得了斑节对虾 TRIAP 1基因(PmTRIAP 1) cDNA全长序列，并利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)技术，对PmTRIAP 1在斑节对虾不同组织中的表达分布 模式，以及哈氏弧菌刺激下PmTRIAP 1与相关miRNAs 的表达关联情况进行了探究。结果显示，PmTRIAP 1 cDNA全长2 522 bp，包括 11 bp 的5非编码区(UTR)、2 289 bp 的3UTR和222 bp 的开放阅读框(ORF)，共编 码73个氨基酸。PmTRIAP 1基因在各组织中均有表达，其中在血细胞中表达量最高；哈氏弧菌刺激下，PmTRI- AP 1表达量显著降低，而Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p表达量显著升高，表明PmTRIAP 1和Pm-miR-145- 3p、Pm-miR-454-3p 的表达量呈负相关关系；双荧光素酶报告实验结果显示，Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454- 3p可通过结合PmTRIAP 1 3UTR 降低荧光素酶活性，表明Pm-miR-145-3p 和Pm-miR-454-3p均可靶向调控 PmTRIAP 1的表达。 关键词： 斑节对虾；TRIAP1；Pm-miR-145-3p；Pm-miR-454-3p；哈氏弧菌 中图分类号： S 917.4  文献标志码： A               开放科学（资源服务）标识码（OSID ）： Cloning, expression analysis of TRIAP1 and its related miRNAs screening in Penaeus monodon 1, 2 1 1 1 1 1, 3