丙二酸盐利用试验标准操作规程.doc

丙二酸盐利用试验标准操作规程 1．目的 规范丙二酸盐利用试验标准操作规程。 2．原理 在丙二酸盐培养基中，细菌能利用的碳源只有丙二酸盐。当某种细菌能利用丙二酸盐时，可将其分解为碳酸钠，使培养基变碱性，使指示剂由绿色变为蓝色。 3．试剂 3.1 枸盐酸盐培养基成分 硫酸胺 2g 酵母浸膏 1g 磷酸二氢钾 0.4g 磷酸氢二钾 0.6g 氯化钠 2g 丙二酸盐 3g 溴麝香草酚蓝 0.025g 蒸馏水 1000ml 3.2 制备 将上诉溶液混合，校正PH至7.1左右。用滤纸过滤，分装试管每管约3ml,置115℃灭菌15分钟，冰箱中备用。 4．质控 大肠埃希菌ACTT 25922为绿色，阴性；肺炎克雷伯菌ACTT 13883为蓝色，阳性。 5.操作步骤 将待检菌接种至丙二酸盐培养基上，35℃孵育1～2日，观察结果。 6.结果判断 培养基由绿色变为蓝色为阳性。 7.注意事项 某些利用丙二酸盐的细菌产碱量少，造成判断困难。可将其与未接种的培养基进行对比。培养48小时后，有蓝色反应为阳性，阴性结果必须在培养48小时后才能作出判断。 8.临床意义 肠杆菌科中亚利桑那菌和克雷伯菌属为阳性，枸盐酸盐杆菌属、肠杆菌属和哈夫尼亚菌属有不同生物型反应，其他各菌属均为阴性。