DB33T 994-2015 西瓜品种枯萎病抗性评价技术规范.pdfVIP

DB33/T 994—2015 西瓜品种枯萎病抗性评价技术规范 1 范围 本标准规定了西瓜品种枯萎病抗性评价技术的术语和定义、鉴定方法、病情调查与判定。 本标准适用于西瓜品种枯萎病抗性鉴定和抗性评定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 抗病性 disease resistance 植物所具有的能够克服或减轻病原物致病作用的可遗传性状。 2.2 抗性评价 resistance evaluation 根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。 2.3 致病性 pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。 2.4 病情级别disease rating 人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。 2.5 病原分离物pathogen isolate 采用人工方法从植物发病部位分离获得的、在特定环境条件下培养的病原物。 2.6 接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 1 DB33/T 994—2015 2.7 接种液inoculum suspension 用于接种的、含有接种体的悬浮液。 2.8 发病率 rate of infected 发病西瓜植株数占总西瓜植株数的百分率。 2.9 病情指数 disease index (DI) 通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式，是描述 发病严重度的综合指标。 3 鉴定方法 3.1 基本设备 恒温箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室 （温度保持在20℃～28℃）、塑料盆、铝 锅、电炉、培养皿、试管、剪刀、镊子、广口瓶、酒精灯、滤纸、三角瓶、恒温振荡箱培养等。 3.2 培养基制作 3.2.1 PDA 培养基 配方为马铃薯200 g、 葡萄糖20 g、琼脂17 g，加蒸馏水至1 000 ml。按培养基配方称取去皮马铃 薯200 g，切成小块放入锅中，加水1 000 ml，在加热器上加热至沸腾，维持30 min，用2层纱布趁热在 量杯上过滤，弃滤渣，取滤液补充水分到1 000 ml；把滤液放入锅中，加入葡萄糖20 g，琼脂17 g，然 后放在石棉网上，小火加热，并用玻璃棒不断搅拌，待琼脂完全溶解后，再补充水分至1 000 ml，调pH 值至6.8～7.0。将配制的培养基分装入试管或500 ml三角瓶内，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞或泡 沫塑料塞后，再在塞子外包一层牛皮纸，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。试管的分装量为 其高度的1/5，灭菌后制成斜面；三角瓶的分装量以不超过其容积的一半为宜，灭菌后倒入灭菌培养皿， 制成平板培养基。 3.2.2 PL 液体培养基 配方为马铃薯200 g、乳糖20 g、加蒸馏水至1 000 ml。按培养基配方称取去皮马铃薯200 g，切成 小块放入锅中，加水1 000 ml，在加热器上加热至沸腾，维持30 min，用2层纱布趁热在量杯上过滤， 弃滤渣，取滤液补充水分到1 000 ml；把滤液放入锅中，加入乳糖20 g，用玻璃棒搅拌后放在石棉网上， 小火加热至沸腾，再补充水分至1 000 ml。将配制的培养基分装入500 ml三角瓶内，在三角烧瓶口上塞 上棉塞或泡沫塑料塞后，再在塞子外包一层牛皮纸，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期后湿热 灭菌。三角瓶的分装量以不超过其容积的一半为宜。 3.2.3 绿豆液体培养基 2 DB33/T 994—2015 配方为绿豆40 g、氯化钠8 g，加蒸馏水至1 000 ml。按培养基配方称取绿豆40 g，放入锅中，加 蒸馏水1 000 ml，在加热器上加热至沸腾，维持30 min，用2层纱布趁热在量杯上过滤，弃滤渣，取滤 液补充水分到1000 ml；把滤液放入锅中，加入氯化钠8 g，用玻璃棒搅拌后放在石棉网上，小火加