柯赫氏法则（一） 病原物的分离与培养.docVIP

柯赫氏法则（一） 病原物的分离与培养 柯赫氏法则（一）——病原物的分离与培养 一、实验目的 1．学会制作普通的培养基。 2．掌握病原物分离、培养和纯化的一般方法。 二、讲解要点 柯赫氏法则（Koch’s Postulate）是通过一系列步骤确定引起病害的病原物的原则和方法，是诊断病害中的证病律。其基本步骤如下： 1．在染病组织上用显微镜经常检查到某种微生物； 2．从病组织中分离得到该微生物，并获得纯培养； 3．将纯培养的微生物接种到健康的感病寄主植物后，发生原先观察到的症状； 4．从接种发病的组织中，再分离，又得到相同的微生物。 全过程拟分两次实验完成，本次完成第一和第二步。包括培养基的制作和病原物的分离、培养及纯化。 （一）培养基的制作 真菌和细菌等微生物与其他生物一样，生长和发育都需要一定的营养条件。不同类群的微生物对营养条件的要求不同。因此，在人工培养微生物时，就必须考虑它们的营养要求。培养基就是按照微生物生长，繁殖所需的各种营养物质，用人工的方法配制的基质。 1．常用培养基的配制 植物病理实验室所用的培养基与一般微生物培养基大致相同，只是植物质培养基用得多些。 （1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基 这是使用最频繁的培养基，简称PDA，主要用于真菌的分离和培养，有时也用于植物病原细菌的培养。配方为： 马铃薯 200g 葡萄糖（蔗糖） 10～20g 琼脂 17～20g 水 1000