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[6057.6ml 25mM pH7.0磷酸缓冲液=6.0576l; EDTA 3.5407g, Na2HPO4·12H2O 542.46g, NaH2PO4·2H2O 236.32g
1500ml提取液 共要提取液5.34
总共需(1) Na2HPO4·12H2O 607.9996g=6.08kg 11.15kg
(2) NaH2PO4·2H2O 238.972g=0.239kg 0.438kg
(3) EDTA 3.5844g 6.571g
(4) TCA 62.5g 114.58g
(5) TBA 6.25g 11.46g
(6) 甲硫氨酸 2.895g 5.3g
(7) NBT 0.0687g 0.126g
(8) 核黄素 0.0007g 0.0013g
(9) 愈创木酚 0.75ml=750μl 1.375ml
(10) 30%的H2O2 3.07275ml 5.628ml
(11) 抗坏血酸 132mg 242mg
(12) NaCl： 3.331g 6.11g
(13) 谷胱甘肽(GSH) 0.38414g 0.704g
(14) NADPH 0.1631g 0.299g
(15) 氧化型谷胱甘肽GSSG： 0.14566g 0.268g
(16) DHA二十二碳六烯酸 0.192g 0.352g
(17) 4.8ml 25U/ml的GR 8.8ml
(18) 4.8ml 50U/ml AsA氧化酶 8.8ml
酶粗提液提取： 0.3*** g 鲜样 ＋ 8ml 0.05M pH 7.8 PBS （参照SOD提取液a.，研磨匀浆，10000 r/min 离心 15 min，上清液即为酶粗提液。
1L 0.05M磷酸缓冲液（pH 7.8）：取0.663g NaH2PO4·2H2O和16.3849g Na2HPO4·12H2O加蒸馏水定容至1L[用480*8=3840ml] 【实际配4L： NaH2PO4·2H2O 2.652g；Na2HPO4·12H2O 65.5396g
25mM pH7.0磷酸缓冲液的配制
A：0.2mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4·12H2O 17.91g用蒸馏水容至
B：0.2mol/L NaH2PO4溶液：NaH2PO4·2H2O 7.8025g用蒸馏水容至1000ml
PBS （25 mM, PH7.0, + 2mM EDTA）: 在200ml 25mM pH7.0磷酸缓冲液里加116.9mg 即0.1169g
2.5 ml TBA－TCA溶液[需1.2 l ，配
▲5%的三氯乙酸（TCA）：50gTCA定溶于1L；[TCA 62.
▲5%的硫代巴比妥酸（TBA）：5gTBA定溶于1L5%的TCA溶液中，成TBA－TCA溶液。[TBA 6.25
2、NBT反应液：[用1440ml，配1500ml]
【1500ml】450ml缓冲液+0.87g甲硫氨酸（待完全溶解后再放入下列试剂）[2.895
+0.0206gNBT[0.068667
+0.00021g核黄素[0.0007g
+0.0131g EDTA（乙二胺四乙酸）[0.043667
▲2700μl PBS （25 mM, PH7.0, + 2mM EDTA）******
▲100 μl 1.5％愈创木酚：1.5ml 定溶于100ml[48ml, 配50ml,需愈创木酚0.75ml]
▲100 μl 300mM H2O2：1.53 ml 30%的H2O2定溶于50ml**【100ml需30%的H2O23.06ml】
A．1.53ml H2O2溶于3.57ml水中，成为30%的H2O2；B.取30%的H2O21.53ml定溶于50ml即可
5、100 μl 7.5mM的抗坏血酸【维生素C又叫抗坏血酸M=176.13】 66mg定溶于50ml
6、100 μl 1.14M NaCl：3.331g溶于50ml蒸馏水中[配50ml,需3.
100 μl 5mM谷胱甘肽(GSH)：0.03841g溶
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