基因工程和食品产业课件.pptVIP

(3)选择、修饰和重组核糖体结合位点及密码子等mRNA的翻译 调控原件，强化受体细胞中蛋白的生物合成过程。这些涉 及到基因表达调控的分子生物学原理。 (4)基因工程菌（细胞）是现代生物工程中的微型生物反应 器，在强化并维持其最佳生产效能的基础上，从工程菌 （细胞）大规模培养的工程和工艺角度切入，合理控制微 型生物反应器的增值速度和最终数量，也是提高外源表 达产物产量的主要环节，这里涉及的是生物化学工程学 的基本理论体。 二、基因工程基本技术 基因工程主要内容 基因工程的实现主要分为四个步骤： 第一步：目的基因的分离或制备：人工分离生物基因组群中 目的基因及内切酶定位切 割或人工酶促合成； 第二步：重组DNA：选择载体及目的基因与载体基因重组； 　 第三步：导入与表达：重组DNA导入受体细胞，目的基因表 达出目的效应和性状； 第四步：筛选、鉴定：筛选、鉴定出含有外源目的基因的菌 体或个体。 （1）从供体细胞中分离出基因组DNA，用限制性核酸内切酶 分别将外源DNA（包括外源基因或目的基因）和载体分 子切开（简称“切”）； （2）用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片断接到载体 上，形成DNA重组分子（简称“接”）； （3）借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中 （简称“转”）； （4）短时间培养转化细胞，以扩增DNA重组分子或使其整合 到受体细胞的基因组中（简称“增”）； （5）筛选和鉴定转化细胞，获得使外源基因高效表达的基因 工程菌或细胞（简称“检”）。 可见，基因工程的上游操作过程可简化： 切 接 转 增 检 基因工程基本技术 1、目的基因的获得与序列分析 1.1 目的基因的获得 鸟枪法 物理化学法 化学合成法 酶促逆转录合成法 PCR扩增法 1.2 DNA序列测定 化学降解法 酶促法 自动化测序 2、目的基因与载体的连接（重组与克隆） 亚克隆 黏性末端连接 平段连接 同聚物加尾连接 DNA重组技术的基本过程 载体系统大肠杆菌质粒 外源DNA系统 内切核酸酶 内切核酸酶 “退火” DNA连接酶 重组质粒 转化 受体系统 感受态细菌 复制 染色体 “工程菌” 重组质粒 DNA重组技术的基本过程 * 基因工程和食品产业 第二章 基因工程与食品产业 第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的原理及基本技术 第三节 基因工程在食品工业中的应用 第一节 基因工程概述 一、基因工程的概念及发展 1、基因工程（gene engineering)： 　 所谓基因工程，就是利用DNA体外重组或扩增技术从供体生物基因组中分离感兴趣的基因或DNA片段，或是经过人工合成的方法获得基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应产生重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。 基因工程(gene engineering)常和以下名称混用: 遗传工程(genetic engineering)； 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique)； 克隆(clone): 作名词时是指含有某目的DNA片段 的重组DNA分子或含有该重组分子 的无性繁殖系。作动词时是指基 因的分离与重组过程。 2、基因工程的发展概况 历史回顾： 70年代初，DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达 。今天，人们在超市货价上可以买到保质期很长的转基因土豆，“多利”克隆绵羊走进实验室，基因工程正在使整个人类生活方式发生重大变革。 2000.6.26宣告人类基因组“工作框架图”绘制完毕。 目前还有许多有价值的微生物，动物，植物的测序工作正在进行中。 人类基因组计划 这一价值30亿美元的计划旨在对人