保健食品中人参总皂甙的测定.doc

保健食品中人参总皂甙的测定 Determination of total ginsenosides in health food 1试剂 1.1 Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司、U. S. A.。 1.2正丁醇 分析纯。 1.3乙 醇 分析纯。 1.4中性氧化铝 层析用，100-200目。 1.5人参皂甙Re 购自中国药品生物制品检定所。 1.6香草醛溶液 称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100mL。 1.7高氯酸 分析纯 1.8冰乙酸 分析纯 1.9人参皂甙Re标准溶液：精确称取人参皂甙Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0mL，即每毫升含人参皂甙Re2.0mg。 2仪器 2.1比色计 2.2层析柱 3实验步骤 3.1试样处理 3.1.1固体试样：称取1.000g左右的试样 （根据试样含人参量定），放100mL容量瓶中，加少量水，超声30min，再用水定容至100mL，摇匀，放置，吸取上清液1.0mL进行柱层析。 3.1.2液体试样：含乙醇的补酒类保健食品，吸取1.0mL试样放水浴挥干，用水浴溶解残渣，用此液进行柱层析。 非乙醇类的液体试样：吸取1.0mL试样（假如浓度高、或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）进行柱层析。 3.2柱层析：用10mL注射器作层析管，内装3cmAmberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25mL70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0mL已处理好的试样溶液（见3.1），用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性杂质，弃去洗脱液，用25mL70%乙醇洗脱人参皂甙，收集洗脱液于蒸发皿中，放水浴挥干。以此作显色用。 3.3显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入5mL带塞刻度离心管中，放在60°C以下的水浴上加温10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。 3.4标准管：吸取人参皂甙Re标准溶液（2.0mg/mL）100?l放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60?C），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2柱层析…”起，与试样相同。测定吸光度值。 4计算： A1 V 100 1 X = ———×C×——×————×———— A2 m 1000 1000 式中： X：试样中人参总皂甙量（以人参皂甙Re计），g/100g; A1：被测液的吸光度值， A2：标准液的吸光度值， C：标准管人参皂甙Re的量，?g V：试样稀释体积，mL m：试样质量，g。 计算结果保留二位有效数字。