保健食品中吡定甲酸铬的测定1.doc

保健食品中吡啶甲酸铬的测定 Determination of chromium picolinate in heath food 1 范围 本方法规定了保健食品中吡啶甲酸铬含量的测定方法。 本方法适用于吡啶甲酸铬作为功效成分添加于片剂、胶囊等试样类型中含量的测定。 本方法的最低检出量10.0mg/kg。 本方法的最佳线性范围：2.00～100μg/mL。 2 原理 将粉碎的胶囊和片剂试样使用甲醇：水=1：1进行提取和稀释，根据高压液相色谱紫外检测器外标法定性定量检测。 3 试剂 3.1 甲醇 优级纯。 3.2 磷酸氢二钾、磷酸二氢钾 分析纯。 3.3 吡啶甲酸铬标准溶液 准确称量吡啶甲酸铬标准品0.0100g，加入甲醇:水=1:1并定容至100.0mL, 如有少量残渣,可使用超声波加速溶解。此溶液每mL含100μg吡啶甲酸铬。 4 仪器设备 4.1 高效液相色谱仪： 附紫外检测器（UV）。 4.2 超声波清洗器。 4.3 离心机。 5 分析步骤 5.1 试样处理： 取20粒片剂或胶囊试样进行粉碎或混匀，准确称取一定量试样于刻度试管中，加入甲醇：水=1：1并定容至20.0mL,超声提取5min后以3000rpm/min离心3min。经0.45?m滤膜过滤后，备用。 5.2 液相色谱参考条件 5.2.1 色谱柱: C18柱 4.6×250mm。 5.2.2 柱温：室温。 5.2.3 紫外检测器：检测波长 254nm。 5.2.4 流动相：0.125mol/L磷酸盐缓冲溶液：乙腈＝425：75。 5.2.5 流速：0.5mL/min。 5.2.6 进样量：10?L。 5.2.7色谱分析：量取10μL标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。 5.3 色谱图 在上述色谱条件下，吡啶甲酸铬的保留时间为7.023。 5.4 标准曲线制备 配制浓度为0.0、2.00、5.00、10.0、50.0、100μg/mL吡啶甲酸铬标准溶液,在给定的仪器条件下进行液相色谱分析,以峰高对浓度作标准曲线。 5.5 分析结果表示 5.5.1计算 h1× C ×V X = ───────── h2×m×1000 式中： X－试样中吡啶甲酸铬的含量，mg/g； h1－试样峰高或峰面积； C －标准溶液浓度，μg/mL； V－试样定容体积，mL； h2－标准溶液峰高或峰面积； m－试样量，g。 5.5.2 结果表示 检测结果保留三位有效数字。 6 技术参数 准确度 方法的回收率在91.5%～98.4%之间 允许差 平行样测定相对误差?±5%。