动物细胞培养概念-襄阳一中.PPT

资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） 1、无菌、无毒的环境 （对培养液和所有培养用具进行无菌处理； 添加一定量的抗生素；定期更换培养液） 2、营养 （要与体内基本相同） 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素（合成培养基）+动物血清血浆等 3、温度和PH （与动物体温和PH相近） 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 课堂反馈练习： 1、动物细胞工程技术的基础是 ------（ 　 ）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体　 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 2、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （　 ）A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强 3、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A.限制性内切酶 B.DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶胃蛋白酶 4、下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是 （ ） A．用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液 D．动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞都衰老死亡 5、一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件 （　　） ①无毒的环境　②无菌的环境　③合成培养基需加血浆　 ④温度与动物体温相近　⑤需要O2，不需要CO2　⑥CO2能调培养液pH A．①②③④⑤⑥ B．①②③④ C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥ 植物组织培养和动物细胞培养的比较 五、体细胞核移植技术存在的问题 胚胎移植－动物幼体产出 概率＜10％ 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议 1、定义：指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。 人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低，产量有限，纯度低，而且制备的抗体特异性差。 怎样获得单一类型的抗体？ 单克隆抗体的制备—极富创造性的方案 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)的设想： 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。 米尔斯坦和科勒因此在1984年获诺贝尔奖。 * 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.制备单克隆抗体 4.细胞核移植 动物细胞工程常用的技术手段： 是其他动物细胞工程技术的基础 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 1、动物细胞培养概念： 原理：细胞增殖 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （细胞贴壁生长增殖长成单层细胞。 2、过程 分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养 加培养液 组织细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖；分散为单个细胞后：保证细胞所需的营养物质和细胞内有害代谢产物的及时排出。 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （贴壁生长长成单层细胞。 至有接触抑制现象）。 2、过程 加培养液 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 细胞的接触抑制 定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （贴