分子生物学16翻译.ppt

Elongation in translation 六、翻译 2. 延伸（elongation） （2）氨酰tRNA结合到核糖体的A位（step 1） 需延伸因子（elongation factor）EF-Tu及GTP，另还需EF-Ts 在真核生物中由eEF1?和eEF1??分别起到EF-Tu和EF-Ts的作用 Model of binding aminoacyl-tRNA to the ribosome A site P A 六、翻译 2. 延伸（elongation） （2）氨酰tRNA结合到核糖体的A位（step 1） 校对（proofreading） 如错误的氨酰tRNA进入了A位（反密码子与密码子不能很好配对），可进行校正 Probable mechanism of incorporation of amino acids into protein Rib：ribosome TC：ternary complex (EF-Tu, GTP, aa-tRNA) 六、翻译 2. 延伸（elongation） （3）肽键的形成（step 2） 通过肽基转移酶（peptidyl transferase），把P位的肽链（或起始氨基酸）与A位的氨酰tRNA中的氨基酸以肽键连结起来 肽基转移酶是核糖体的组成部分，且存于核糖体大亚基中 六、翻译 2. 延伸（elongation） （3）肽键的形成（step 2） 肽基转移酶 核糖体大亚基中的23S（真核生物中为28S）rRNA在催化肽键形成中起主要作用，具肽基转移酶活性 Effect of protein- removing reagents on peptidyl transferase activities of E. coli and Thermus aquaticus ribosomes Sensitivities of Thermus aquaticus fragment reaction to peptidyl transferase inhibitors and RNase 六、翻译 2. 延伸（elongation） （4）移位（translocation, step 3） mRNA与肽基tRNA（peptidyl-tRNA）移动1个密码子的距离，使肽基tRNA进入P位，而原在P位的tRNA离开核糖体 移位需EF-G及GTP 在真核生物中由eEF2起到EF-G的作用 Dependence of translocation on EF-G and GTP 六、翻译 3. 终止（termination） （1）终止密码子及终止抑制 终止密码子（termination codon） UAG：琥珀密码子（amber codon） UAA：赭石密码子（ochre codon） UGA：乳白密码子（opal codon） 六、翻译 3. 终止（termination） （1）终止密码子及终止抑制 过早终止突变 琥珀型突变（amber mutation）：在编码区经突变产生了琥珀密码子，使蛋白质翻译过早终止 赭石型突变（ochre mutation） 乳白型突变（opal mutation） 六、翻译 3. 终止（termination） （1）终止密码子及终止抑制 终止密码子抑制（stop codon suppression） 琥珀型抑制（amber suppression），琥珀型抑制物（amber suppressor） 赭石型抑制（ochre suppression），赭石型抑制物（ochre suppressor） 乳白型抑制（opal suppression），乳白型抑制物（opal suppressor） Mechanism of suppression 谷酰胺 (amber mutation) 酪氨酸 六、翻译 3. 终止（termination） （2）释放因子（release factors，RFs） 翻译的延伸到达终止密码子后，肽链合成终止并从核糖体释放出来 终止过程需要释放因子 在原核生物中，释放因子有RF-1、RF-2、RF-3 六、翻译 3. 终止（termination） （2）释放因子（release factors，RFs） RF-1：能识别终止密码子UAA和UAG RF-2：能识别终止密码子UAA和UGA RF-3：一种依赖于核糖体的GTPase， RF-3先与GTP结合，然后能促进RF-1和RF-2与核糖体结合 六、翻译 3. 终止（termination） （2）释放因子（release factors，RFs） 在真核生物中，释放因子有eRF1和eRF3 eRF1能识别3种终止密码子 eRF3是一种依赖于核