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D二聚体的检测和临床应用;D-Dimers定义;;;一、D-二聚体的形成;;DDU与FEU;D-二聚体检测的应用现状;D-二聚体检验方法的演变;D-二聚体临床应用进展;无统一的国际标准
目前有超过30种检测方法和20多种单抗被使用。
存在两种报告单位:
D-dimer(DDU)和纤维蛋白原当量(FEU)
抗体对D二聚体不同片段有不同的亲和力
不同的试剂有不同的干扰情况
;排除静脉栓塞的试剂要求;*;*;;D-Dimer检测技术和应用的发展;(1)胶乳凝集法:经典胶乳凝集法是将被检血浆中D-二聚体或FDP与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体发生抗原-抗体反应,产生肉眼可见的凝集反应,进行定性或半定量测定(FDP>5mg/L、 D-二聚体>250μg/L)。
该法操作简便、快速、经济,适用于床旁检测,常作为筛查试验用。为定性试验,半定量时费试剂,结果判断有主观差异,敏感性和NPV低于ELISA. ;(2)自身红细胞凝集法:自身红细胞凝集法采用分别针对D-二聚体和红细胞膜上双表位抗体,当血中D-二聚体水平升高时,抗原-抗体结合的增多而导致红细胞凝集,2min内可以判断结果,为半定量的自身红细胞凝集试验。
其优点是可用全血检测,省去了离心制备血浆的麻烦。缺点是敏感性低和不能定量。;(3)胶体金免疫渗滤反应法:该法是将单克隆抗体吸附在多孔薄膜并粘放在有多层吸收垫的塑料盘上,被检标本加入后即与该抗体结合,然后加入胶体金标记的抗体,形成抗体-抗原-金标抗体复合物在薄膜上即产生紫红色沉淀,紫红色强度与血浆中抗原成比例,在几分钟内即可完成。
该法易受白细胞、血小板、类风湿因子、肝素及血脂等物质的干扰,特异性不强,在不同的报道中其敏感性和阴性预测值(NPV)差别较大,并且厂商和实验室的结果存在较大的差异。;(4)酶联免疫吸附法(ELISA):ELISA法检测原理是包被在固相载体的抗人D-二聚体或FDP抗体与待测标本中抗原结合,再加入酶标抗体后形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,再加入底物呈显色反应,测得的吸光度值与标本中抗原量成正比。
该法具有灵敏度高、定量准确等特点,但经典ELISA法操作步骤复杂、费时,影响因素较多,不适合急诊使用。;(5)胶乳增强型免疫比浊法:胶乳免疫比浊法是样本中抗原与包被在胶乳颗粒上的单克隆抗体发生抗原-抗体反应,在一定的缓冲体系中产生凝集而导致浊度增大,浊度的变化率与抗原浓度成正比。
目前,已有多种全自动血凝仪用于免疫比浊法D-二聚体和FDP的检测,整个检测过程可以由仪器自动完成,检测效率高,除去准备标本的时间,一般只要5min便可报告准确的定量结果。该法有操作简便、快速、定量准确、敏感度高等优点,可满足急诊需要,在临床研究中应用越来越广泛。但需要专门仪器,成本高。;D-dimer检测方法的比较;D-Dimer含量问题;D-Dimer特点;*;1.DVT和PE的排除;1.DVT和PE的排除;Cut off; 1、用于排除DVT ,而不是诊断DVT
2、用于排除PTE ,而不是诊断PTE
3、在可疑VTE患者中的其它应用
(1)在无症状的高危患者中筛选DVT/PTE
(2)诊断复发VTE
4、在DIC诊断中的意义
5、溶血栓治疗的监测;VTE中国发病率趋势;VTE中国发病率和致死率;2.弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断;2.弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断;2.弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断;D-dimer与FDP在诊断DIC中的应用:; D-二聚体是溶栓药物治疗和疗效观察的指标,唯有 D-二聚体可反映血栓形成后溶栓的活性,应用溶栓药物后 D-二聚体明显升高。若达到疗效,D-二聚体升高后很快下降;如果D-二聚体升高后维持在一定程度高水平或无明显升高,则提示溶栓药物剂量不足。D-二聚体恢复正常是停止溶栓的指征,不同疾病的溶栓治疗其 D-二聚体峰值出现时间有所不同。急性心肌梗死、脑梗死溶栓后,D-二聚体1~6 h 达到峰值,24 h 降到溶栓治疗前水平。DVT 溶栓治疗时 D-二聚体峰值出现时间平均为 3 d,治疗 7 d 后维持在相对稳定的高水平,14 d 后降至溶栓前状态,;3.溶栓治疗的监测;? 明显升高(与治疗前比较有数倍变化)
? 出现山峰状改变说明溶栓药物达到疗效
? 从峰值下降后可以逐渐停药
? 升高后维持一个平台期,则提示用药不足
;溶栓过程中提示会发生出血副作用的指标;4. 评估溶栓或抗凝治疗后血栓复发风险;5.孕妇D二聚体水平;5.孕妇D二聚体水平;妊娠20周D-二聚体与FDP的变化;妊娠36周D-二聚体与FDP的变化;6.儿科疾病D-二聚体检测的阳性率;6.儿科疾病D-二聚体检测的阳性率;6.儿科疾病D-二聚体检测的阳性率;7.老年人D二聚体水平;7.老年人D
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