如何选择蛋白印迹成像与定量分析技术.docVIP

如何选择蛋白印迹成像与定量分析技术 　　western blot技术在蛋白定量分析中的选择应用 　　蛋白质印迹(western blot)，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot 是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。 　　如何选择蛋白印迹成像与定量分析技术?通常，Western Blot显色的方法主要有以下几种：1、放射自显影;2、底物化学发光ECL;3、底物荧光ECF;4、底物DAB呈色等。下面我们将分别对这四种方法进行介绍，同时向大家呈现每种方法的应用特点。 　　放射自显影radioautography：利用放射性核素发射的射线，使感光材料中的卤化银等感光，显出影像后进行放射性标记物的定位和定量测量的技术。此技术的特点是灵敏度高、分辨率好、保存时间长久，但由于实验所用方式性物质对人体有辐射作用，目前该技术在蛋白研究中应用较少，多用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。 　　底物DAB呈色：二氨基联苯胺(Diaminobenzi