组织细胞培养技术课程教学大纲.docVIP

《组织细胞培养技术》课程教学大纲 课程编码课程名称：组织细胞培养技术 英文名称：Cell and tissue culture technology 开课学期：第二学期 授课对象：统招硕士 开课院系：基础医学院 开课教研室：病理学与法医学教研室 学时：40 （其中理论学时：20 实验学时：20 ） 学分：0.5 课程类型：公共选修课 （公共必修课/选修课/专业课） 选用教材：自编教材《组织细胞培养技术》 主要参考书：⑴鄂征主编. 组织培养和分子细胞学技术.北京：北京出版社，1994。⑵施新猷主编.实验动物学. 北京：人民军医出版社，2000。 大纲编写人员：张宏颖副教授 课程目的与任务 组织细胞培养技术是研究组织和细胞的技术方法，被培养的组织和细胞也是实验研究的对象。本课程是医学临床与基础专业硕士研究生的公共选修课程之一，在医学各专业高级人才培养中具有重要地位。本课程系统介绍了组织和细胞培养技术有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术，及其在医学研究和临床实践中的应用，该领域的研究历史和最新发展动态；转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用及前景展望。旨在提升医学专业硕士研究生的知识结构，掌握现代生物技术中的基本实验技能，培养学生开拓创新的能力，适应未来学科发展对人才的需求。 二、教学基本要求 本课程系统地论述了组织细胞培养技术的理论和方法，简要介绍了转基因动物技术及应用。要求学生全面系统地掌握组织细胞培养的操作过程，了解各种操作的基本原理；有判定细胞生长好坏和是否发生污染的能力；熟悉体外培养细胞的生存条件、细胞的生物学性状和与此有关的基本理论知识，了解国内外细胞培养的最新动态和研究进展，了解转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用，并能自行根据需要设计实验，运用所学技术解决科研中的实际问题，提高学生综合分析问题，系统利用专业知识的综合素质。 三、各章节内容及学时分配 第一章 组织培养技术的基本理论知识（4.5学时） 目的与要求 掌握组织培养基本概念；了解对组织培养的评价；熟悉对组织培养工作者的要求和工作方法。 了解体内外细胞的差异与分化；掌握培养细胞形态分类及培养细胞的大体形态；熟悉组织培养细胞的生长和增殖过程。 熟悉培养细胞生存环境和条件。 掌握体外培养细胞成功的关键步骤；熟悉体外培养细胞成功所需要的条件。 熟悉体外培养细胞的种类和命名；掌握建立细胞系或细胞株的要求；熟悉已建立细胞系或细胞株的鉴定、管理和使用的规则。 教学内容 第一节 组织培养基本概念（0.5学时） 1、组织培养基本概念：组织培养、细胞培养、器官培养 对组织培养的评价：组织培养的优点与缺点 对组织培养工作者的要求和工作方法 本节重点、难点：组织细胞培养所涉及的基本概念 第二节 组织培养细胞生物学（2学时） 1、体内外细胞的差异与分化：体内外细胞的差异的表现，分化的概念、机制、细胞分化的关键 2、培养细胞形态分类：贴附型和悬浮型；贴附型：成纤维型、游走型、上皮型和多形型 3、培养细胞的大体形态：贴附型和悬浮型；体外培养活细胞的形态及细胞机能状态不良的形态 4、组织培养细胞的生长和增殖过程：传代；组织培养细胞生命期：原代培养期、传代期、衰退期 本节重点、难点：体内外细胞的差异与分化；培养细胞的形态分类；传代的概念；原代培养期、传代期、衰退期的概念及特性。 第三节 培养细胞生存环境和条件（0.5学时） 1、无污染环境 2、温度 3、气体环境和氢离子浓度 4、体外培养细胞生存所需基本物质：糖、氨基酸、促生长因子、元素、促细胞贴附物质 5、渗透压 6、培养基：合成培养基、天然培养基、无血清培养基 7、附着底物：锚着依赖性的概念；几种常见的附着底物玻璃、一次性塑料、微载体、饲细胞 8、抑制细胞生长因素 9、细胞代谢和调控 本节重点、难点：无污染环境；温度；气体环境和氢离子浓度；培养基；附着物 第四节 体外培养细胞成功率的分析（1学时） 1、组织和细胞供体年龄 2、培养条件 3、贴附底物 4、培养方法 本节重点、难点：体外培养细胞成功的关键步骤 第五节 建立细胞系或细胞株（0.5学时） 1、体外培养细胞的种类和命名：初代培养、细胞系、克隆细胞株、肿瘤细胞系或株、有限细胞系、无限细胞系、亚系、二倍体细胞、遗传缺陷细胞；几个常见的肿瘤细胞系或株的名称 2、建立细胞系或细胞株的要求：组织来源、细胞生物学检测、培养条件和方法 已建立细胞系或细胞株的鉴定、管理和使用 本节重点、难点：初代培养、细胞系、克隆细胞株、肿瘤细胞系或株的概念；建立细胞系或细胞株的要求。 第二章 组织培养设施和基本条件（2学时） 目的与要求 1、掌握组织细胞培养实验室的设计原则和组织培养工作包括的内容 2、熟悉无菌操作设施和工作间的布局