第二章生物芯片分类.pptVIP

采用石英玻璃制作芯片，其流路是采用光刻方法制作的，用第二层玻璃使通道密封，芯片尺寸为1.78cm*1.78cm。中间通道为毛细管电泳分离通道，长约为1.5cm。片上4个较大的孔为缓冲液及标准梯形条带试样池，12个较小的孔为试样池，分别通向分离通道并与之交叉。流体由电动压力驱动并沿着芯片流动，分子通过与毛细管壁表面的相互作用而带上电荷，然后通过对通道施加电位使得分子沿着通道流动；化合物并入来自另一通道的试剂流中，形成一列反应混合物，，顺序流过分析器（如芯片上的紫外或荧光检测器），全部过程只需60s. * 这是Agilent公司2100系列 LOC 的示意图，2100系列可能是目前产业化最好的LOC产品，这种LOC可以用于RNA 、DNA 、蛋白以及细胞的分析，是一个电泳LOC，分析速度很快，样本需求量很少，结果分析更加明晰和简单。 * * 该技术的核心是把不同大小（4.5～7μm）或不同荧光染料染色的聚苯乙烯小球，统称编码微球，共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达数十种甚至几百种不同的生物学反应。最后用流式细胞检测类仪器进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。 Luminex技术发展历程简介 1997Luminex 公司推出第一台商品化的可用于多指标联检的多功能流式点阵仪 2001INOVA基于该技术的“QUANTA PLEX ENA PROFILE4” 通过了美国FDA认证 2005年6月《Nature》发表基于该技术的有关microRNA和癌症关系的学术论文 2005年 11月14日，该技术获得年度国际临床诊断技术革新奖 截止2009年1月，基于该技术平台已有48种产品，总共约300种指标通过美国FDA的严格认证，进入临床应用 流式荧光技术，是基于激光激发荧光的发光类技术之一，又称悬浮阵列、液态芯片，是一个高通量、高速度以及多功能生物技术平台，它有机地整合了编码微球 （code beads）、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，造就了其无与伦比的检测特异性和灵敏度，可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究，得到各权威机构和医学界高度认可，是临床诊断领域以及生命科学研究中的一大热点。 ?  * 液态芯片是一种全新概念的生物芯片。该技术的核心是把微小的聚苯乙烯微球（粒径为5.6um）用荧光染色的方法进行编码（微球的颜色是通过两种荧光染料染色得到的，调节两种荧光染料的比例可以获得100种不同颜色的微球），然后将每种颜色的微球（或称为荧光编码微球）共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的生物学反应。最后用仪器进行分析，通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。因为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以在一个微量液态反应体系中同时检测多达100个指标。因含微球的溶液肉眼观看是澄清透明的，所以又有“ liquid chip，液态芯片，流式芯片”之称。该仪器在我国SFDA进口注册时被称为“多功能流式点阵仪”。 * 该技术的核心是把不同大小（4.5～7μm）或不同荧光染料染色的聚苯乙烯小球，统称编码微球，共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达数十种甚至几百种不同的生物学反应。最后用流式细胞检测类仪器进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。 * 一个微球上交联一千万个抗体 * * So how does this work? Different bead codes or colors are used to simultaneously assay for multiple reactions in a single well. In this example, we use 4 different beads, each with a different color code. We might want to screen for the presence or absence of 4 cytokines. Each of the beads of a specific code have a unique