经过多种细胞及细胞器的贮存.PPTVIP

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它以电子计算机为处理工具,来分析化合物结构与活性之间的关系,从而确定一个化合物分子式中哪一部位为其活性部位,然后在农药活性测定及电脑分析的指导下,设计出结构新颖的具有高的生物活性的化合物。 拟除虫菊酯类结构式 DNA基本操作技术 RNA基本操作技术 基因克隆技术 蛋白质组和蛋白质组学技术 基因表达研究技术 基因敲除技术 蛋白质及RNA相互作用技术 利用酵母鉴定靶基因功能 基因芯片及数据分析 DNA重组操作示意图 聚合酶链式反应技术(PCR) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用 细胞毒理学在杀虫剂作用机理方面的应用 电生理测定方法在杀虫剂作用机理方面的应用 QSAR分析方法 分子生物学研究方法在杀虫剂作用机理方面的应用 高通量筛选(high throughput screening,HTS )就是以玻璃片、膜片或培养板为载体,用高密度、微量自动化加样的方法,实现短时间内分析大量样本的筛选方法。 采用传统方法,一年内仅能筛选75000个样品。 采用高通量筛选,每天的筛选量可高达100 000种化合物。 自动化操作系统 高灵敏度的检测系统 分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型 被筛样品管理库 数据采集传输处理系统 对样品成分进行大规模的生物活性筛选,是高通量筛选的最主要的应用。 高通量筛选流程图 赵元弟,杜磊,陈同生,曾绍群,骆清铭.高通量药物筛选技术的研究现状及光编码技术在其中的应用.激光生物学报,2003(03). 从分子水平、细胞水平认识药物的作用和作用机理。 MTT法与细胞毒性 流式细胞术 MTT法(MTT比色法),是一种检测细胞存活和生长的方法。 其原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。 流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种在液流系统中,快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。 其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。 根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。目前最高分选速度已达到每秒钟3万个细胞。 流式细胞术检测细胞凋亡图 1791 年,Galvanin 发现动物的肌肉电位 1849年,Dubois等改进刺激技术和记录技术,发现生物电的两种基本形式——静息电位和动作电位,使电生理学逐渐成为一门独立的学科。 随着近代电子技术和分子生物学的发展和应用,电生理学成为研究昆虫生理功能的一项专门技术和方法。 研究杀虫剂的毒理机制 研究杀虫剂的抗药性和选择性 目前的研究主要是感觉神经器官和神经系统的电活动。 张龙.飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.生命科学,2010(12). 膜片钳技术(patch-clamp technique) 是在电压钳基础上发展起来的一种新技术, 可在很小膜面积上进行电压钳制, 即可将细胞膜上一个通道的电位固定在一定水平, 观察流过通道的离子电流。 (Quantitative structure-activity relationships,QSAR) ——定量结构活性相关性 QSAR的原理是基于设想农药分子进入生物体内,通过一系列的生物膜,经过多种细胞及细胞器的贮存、释放,最终到达作用部位,与靶标作用,从而产生活性反应。 QASR是对已知先导化合物的一系列衍生物进行定量的生物活性测定,分析衍生物的主要物理化学参数和生物活性之间的关系,建立结构——活性数学模型,并以这种数学模型来指导药物分子设计,克服盲目大量合成筛选的弊端。 天然除虫菊酯结构式

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