B23通过抑制Eg5ATP酶窝活性抑制Eg5对微管的解聚.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 中国科学技术大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的 中国科学技术大学学位论文原创性声明 本人声明所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含任何他人已经发表或 撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中作 了明确的说明。 作者签名： 签字日期地棚 中国科学技术大学学位论文授权使用声明 本人授权中国科学技术大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权按 有关规定向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅 和借阅，可以将学位论文编入《中国学位论文全文数据库》等有关数据库进行 检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人提交 的电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 作者签名： 秘 导师签名： 签字日期：．越(羹鲴酗9日 签字日期： 第1 第1章绪论 第1章 绪论 1．1 B23蛋白和细胞命运调控 B23蛋白，简而言之，是一个高度保守，持续表达，且功能强大的核仁磷 酸蛋白。 核仁磷酸蛋白B23，又称作NPM。作为一个高表达的磷酸蛋白，B23蛋白通 常定位于核仁颗粒区。已有的报道表明，B23以及其他核仁蛋白一起参与多种 生命活动，包括核糖体生物合成，核糖体RNA运输及装配，蛋白质合成以及蛋 白质运输，和中心体复制等；并通过调控细胞周期、细胞衰老、细胞生长、细 胞增殖、细胞信号转导、细胞应激等生命活动调控细胞命运。 1．1．1 B23简介 人源B23基因定位于染色体5q35，含12个外显子(Yoneda—Kato，Look et a1． 1996)。B23基因的表达会因基因剪切方式不同产生两种蛋白质亚型，分别是含 294个氨基酸残基的亚型1和259个氨基酸残基的亚型2。我们研究的为其全长 的亚型l，也是通常意义上所称的B23蛋白(Schmidt—Zachmann，Hugle—Dorr et a1．1987：Feuerstein，Chan et a1．1988)。 B23蛋白具有高度的保守性。B23蛋白的氨基酸序列与大鼠的同源物具有 98％同源率，而与非洲爪蟾的同源物N038具有64．3％同源，这也暗示了B23 蛋白在生物进化中起着重要的生命作用(Schmidt-Zachmann and Franke 1988)。 B23蛋白具有持续表达能力，在高增殖组织如胚胎(Grisendi，Bernardi et a1．2005)、肝脏(Rang，Olson et a1．1975)、大脑等细胞内以及肿瘤细胞(Rang， Olson et a1．1975)中都存在高丰度表达，而且其在细胞内的稳定性非常好， 不容易被蛋白酶体降解。尽管有报道称，B23蛋白能够被泛素化修饰，然而这 种泛素化修饰并非是通过K48位(48位赖氨酸)连接的而是通过K6位(6位赖 氨酸)连接的(Okuwaki 2008)，所以被泛素化修饰的B23蛋白并非被蛋白酶体 降解(甚至相反，B23蛋白更加稳定)，而可能与细胞内的信号转导相关联。当 然，也有文章报道，B23蛋白能够被K48位连接泛素化修饰并进而被蛋白酶体 降解，且这种修饰收到ARF蛋白调控。但这种修饰的出现并非是正常细胞内的， 而其具体机制如调控B23蛋白的这种泛素化修饰的E3连接酶是什么仍然有待进 一步研究。同时，B23蛋白也能够在细胞体内进行SUMO化修饰(Yun，Wang et a1． 第l 第l章绪咤 200S)，而sI．姒}化修饰所导致的结果是523蛋白更加稳定。简而言之，在岛增 殖组织及肿瘤细胞中都存在商丰度表达的H23蛋白具有持续表达且异常稳定的 生物学特肚。 1 1 2 B23的结构分析 结构上，023蛋n与家族其他蛋白质相似，具有三个相对独立的结构域 ( ngoran J．Szebeni et ai 2000)。包括K一末端OMC结构域．叩寡聚化分予 伴侣结构域．HBD结构域，即纽蛋白结合结构域；DRBH结构域，即DNA／RxA结 合结构域。恰如其名，B23蛋白OMC结构域是B23蛋白行使自身寡聚化以及行 使分于伴侣功能的结构域：HBD结构域是B23蛋白与组蛋白发生相互作用的结 构域，拥仃很多酸性氨基酸；DRBD结构域是B23蛋门与核酸结合的结构域，拥 有搬多碱性氨基酸。023蛋白在结构上容易发生磷酸化．在细胞__}4期中．能够 被细胞埘期依赫的相关磷酸激酶如CDK2／cyclinl：磷酸化调控(Okuda，Horn et “、2000)。在急性髓系白血痫(acute myekld leukemia，州L)患者体内，B23蛋 白容易发生c末端DRBD鲒