Ⅰ姜黄素半互穿式羟丙甲纤维素明胶微球给药系统的研究ⅡOX26NGFβ融合蛋白的基因克隆及其表随达纯化.docx

11111 11111 1 11111 111 1 11I ＼1 92597 1 独创性声明 本人卢明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的 研究成果，除了文中特别加以标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果，也不包含为获得墨鲞盘鲎或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示了谢意。 ：- ， ’ 学位论文作者签名：l殷支‘史 签字日期：驯驴年芗月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解苤盗盘堂有关保留、使用学位论文的规定。特授 权苤盗盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。 (保密的学位论文在解密后适用本授权说明) ， 多丧曼j殳 翩繇敦 ，再 学位论文作者签名： ·气 签字日期：州。年罗月，口日 辩醐≯‘3胁日 ? . P 摘要第一部分 摘要 第一部分 近年来，姜黄素在抗氧化、消炎、抗肿瘤、等疾病领域具有良好的药理活性， 已经成为了药物研发的热点之一。虽然如此，姜黄素却具有稳定性差、水溶性差、 生物利用度低等缺点，极大地限制了其开发成药。针对这一问题，诸如微乳制剂、 包合物技术等很多手段被提出，但是利用凝胶微球给药系统却尚未见报道。本文 厶 试图提出一种新的由高吸水性材料羟丙甲纤维素(HPMC．Hydroxypropyl methyl cellulose)和天然高分子材料明胶(Gelatin)所构成的半互穿式高分子网络凝胶微球 1 (Semi-IPN gel microsphcre，Semi-interpenetrating polymer network gel microsphere) 作为给药系统，来解决姜黄素稳定性差、溶出度低和生物利用度低的问题。 文章首先采用紫外分光光度法建立了姜黄素体外分析方法，发现姜黄素在 421nm处有最大吸收波长，且线性浓度范围为0--10pg／mL：该方法符合药典规定。 对于稳定性的研究表明光强越强、温度越高、酸性或者碱性越强，姜黄素稳定性 越差。而对于溶解度的研究则表明，在水和环己烷中姜黄素溶解度极低，在HPMC 溶液中则溶解度大大增加(达到1027pg／mL)，因此利用这一特点，制备 HPMC．Gelatin半互穿式凝胶微球，以解决其溶出度低的问题。 其次，通过实验确定了搅拌转速为500rpm、相比为3：1和分散剂选用单硬 酸甘油酯(用量为0．69／30mL环己烷)的反向悬浮聚合工艺。采用这一工艺，成 功制备出了9个处方的微球。用傅立呻变换红外光谱表征了半互穿网络结构的形 成；采用扫描电镜、光学显微镜和激光粒度分布仪观察微球，结果表明微球呈球 形、表面光滑、平均粒径为2019m，粒径分布窄。另外实验结果表明表明随着交 联剂用量的增加和HPMC含量的减少，平衡吸水倍率和吸水速率在逐渐减小， 机械强度在不断增加。空白微球的制备，为制备载药微球奠定基础。 A 第三，采用反相悬浮的手段，在不同交联剂和HPMC／GelatinLg例条件下，成 功制备了包载有姜黄素的载药微球，并进行了如下表征：扫描电镜和光学显微镜 写 观察微球的形貌：激光粒度扫描仪分析其平均粒径；傅立叶红外光谱仪表征药物 包载入球后是否保持原型；X．RD和DSC表征药物在微球中的存在形式。结果表 明载药微球呈球形，表面光滑，平均粒径为216肛m，药物以原型形式被包载进入 到微球中，有晶体形式存在。另外还通过稳定性试验，表明与原料药相比，微球 中的姜黄素稳定性有所提高，因此凝胶微球可以增加姜黄素的稳定性。 第四，文章还考察了HPMc／Gelatin比例和交联剂用量对姜黄素载药微球包封 ? 、， J.} 户 率和体外释放的影响。结果表明随着HPMC含量的增加和交联剂的减少，包封率 率和体外释放的影响。结果表明随着HPMC含量的增加和交联剂的减少，包封率 有所降低，姜黄素溶出度在增加。对于体外溶出行为，采用Higuchi’s模型对有效 扩散系数D进行拟合。结果表明，随着HPMC／Gelatin比例的增加和交联剂用量的 减少，有效扩散系数在增加。 第五，采用高效液相色谱法建立了姜黄素体内分析方法，计算了药动学参数 和生物利用度。结果表明该方法符合《中国药典》的规定，该微球制剂在体内的 吸收呈单室模型，其相对于原料药的生物利用度提高了4．8634-1．185倍。 通过以上研究，姜黄素借助于半互穿式HPMC．Gelatin凝胶微球这一新型的 给药系统后，溶出度、稳定性和生物利用度得到了很大提高。同时，这一给药系 统