【全程复习方略】（福建专用）高中生物 1.1.1、1.2DNA重组技术的基本工具 基因工程的基本操作程序配套名师优质课件 新人教版选修3.pptVIP

答案：（1）目的基因 载体 同一种限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的切割位点 （2）受精卵 显微注射技术 基因表达载体的构建 （3）检测到相应蛋白质 已患高血压 （4）胚胎移植 【互动探究】（1）如果把鼠换成植物，则导入受体细胞的常用方法改变吗？ 提示：变成农杆菌转化法。 分析：植物细胞与动物细胞具有不同的特点，导入的方法是根据操作的需要进行的，如利用农杆菌易感染植物的特性。 （2）分子水平检测除蛋白质检测外还有什么检测方法? 提示：DNA分子杂交、核酸分子杂交。 分析：利用DNA探针检测目的基因或相应的mRNA存在与否，说明目的基因是否存在或是否转录。 1.（2012·福州模拟）浙江大学农学院喻景权教授的课题组最新研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。研究人员发现，用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450和GsT)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答： （1）获得油菜素内酯基因的方法有_____________（举二项即可）。第①步用PCR技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指_____________。步骤②用到的酶有_____________。 （2）图中导入重组质粒的方法是______________。在导入之前 应用______________处理。 （3）导入重组质粒以后，往往还需要进行检测和筛选，可用 ______________制成探针，检测是否导入了重组基因；在培养 基中加入______________可将含有目的基因的细胞筛选出来。 （4）请你为该课题命名______________。 （5）请你说说该研究发现的生态学意义： _________________ __________________。 【解析】（1）油菜素内酯基因是目的基因，获得目的基因的方 法有：从cDNA文库中获取、从基因文库中获取、人工合成目的基 因或利用PCR技术扩增等。PCR技术中耐高温的酶是DNA聚合酶 （Taq酶）。步骤②是对质粒进行剪切和拼接，要用到限制酶和 DNA连接酶。（2）将重组质粒导入受体细菌中，采用Ca2+转化 法，导入前应用CaCl2溶液处理，成为感受态细胞，增加受体细 菌细胞壁的通透性。（3）对目的基因进行检测和筛选中应用红 霉素抗性基因制成探针，检测是否导入重组基因；为筛选出含有 目的基因的细胞可在培养基中加入红霉素。（4）课题命名可以 是：探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解。（5）该项研 究的意义：加速农药的分解，降低植物体内的农药含量，有利 于环境保护和人体健康。 答案：（1）从cDNA文库中获取、从基因文库中获取、人工合成 目的基因或利用PCR技术扩增（任答两项即可） Taq酶 限制酶和DNA连接酶 （2）Ca2+转化法 氯化钙溶液 （3）红霉素抗性基因 红霉素 （4）探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解 （5）加速农药的分解，降低植物体内的农药含量，有利于环境保护和人体健康 2.(2010·福建高考)红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO），其简要生产流程如图。请回答： （1）图中①所指的是_______________技术。 （2）图中②所指的物质是_______________，③所指的物质是 _______________。 （3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产 物积累对细胞自身造成危害，应定期更换_____________。 （4）检测 rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌 该单克隆抗体的____________细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。 【解析】本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法），由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。进行反转录的模板是mRNA。由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO），所以重组CHO细胞能够表达出重组人红细胞生成素(rhEPO）或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养