【全程复习方略】高考生物大一轮复习 专题1 基因工程名师优质课件 新人教版选修3.ppt

【解析】(1)DNA酶作用于DNA分子后，若将DNA分子切割成片段，应作用于磷酸二酯键，蛋白酶作用于蛋白质中的肽键。 (2)酶的作用特点是具有专一性。 (3)若用DNA片段构建重组质粒，需要与限制性核酸内切酶切割的识别序列进行比对，选用切割后获得的相同片段所对应的限制性核酸内切酶进行切割。 (4)RNA聚合酶特定结合启动子中RNA聚合酶结合位点。 (5)蛋白酶特定处理蛋白质，DNA分子杂交和mRNA与基因的互补都体现了碱基互补配对原则。 答案：(1)磷酸二酯键　肽键　(2)专一性 (3)限制性核酸内切　(4)启动子(或转录起始区) (5)A、C、D 3.(2012·江苏高考)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题： (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 　　　　　　　　　连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 　　　　末端，其产物长度为　　　　　　　　　　。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有　　　　种不同长度的DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是　　　　。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加　　　　的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解题指南】解答本题特别关注以下三点： (1)明确碱基、磷酸和脱氧核糖之间的连接关系。 (2)准确识别各种限制酶的切割位点。 (3)知道重组质粒中最少含有一种抗性基因。 【解析】(1)两条脱氧核苷酸链之间的碱基通过氢键相连，一条脱氧核苷酸链中相邻的碱基通过脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖连接。 (2)根据限制酶SmaⅠ识别的碱基序列可知，限制酶SmaⅠ切割产生的末端为平末端。在图1序列中共有2个SmaⅠ的切割位点，切割后形成3种不同长度的产物，分别为537 bp、790 bp、661 bp。 (3)图1中有SmaⅠ的两个识别序列，完全切割后产生3个不同长度的DNA片段，若虚线方框中的碱基对被T-A碱基对替换，再经SmaⅠ识别并完全切割后会产生2个DNA片段，其中1个DNA片段与未替换前完全切割的相同，因此经完全切割后共产生4种不同长度的DNA片段。 (4)切割目的基因可选用限制酶BamHⅠ和限制酶MboⅠ，但限制酶MboⅠ可将质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因都破坏，而限制酶BamHⅠ只破坏抗生素A抗性基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ；重组质粒中含有抗生素B抗性基因，因此可在含抗生素B的培养基上培养。 答案：(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平　537 bp、790 bp、661 bp (3)4 (4)BamHⅠ　抗生素B　同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接 【延伸探究】 (1)若本题(1)中“一条”换为“两条”，则依靠什么结构连接？ 提示：DNA两条链通过碱基互补配对形成氢键的方式连接在一起。 (2)对图2所示的质粒用MboⅠ限制酶切割后，放在含有抗生素A的培养基中培养，能否生长？为什么？ 提示：不能生长。因为抗生素A抗性基因中含有GATC序列，一旦用MboⅠ限制酶切割该质粒后，会破坏该基因，从而无法抵抗抗生素A。 4.(2012·福建高考)肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。 请回答： (1)进行过程①时，需用　　　　酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为　　　　。 (2)进行过程②时，需用　　　　酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 (3)研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取　　　　进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中　　　　(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。 【解题指南】解答本题的关键是注意两点： (1)目的基因和载体需用同一种限制性核酸内切酶切割。 (2)题干信息“let-7基因导入肺癌细胞实现表达，