第三章谷氨酸生产菌的特征育种及扩大培养课件.ppt

第三章 谷氨酸生产菌的特征、育种及扩大培养1;目录 contents ;第一节. 谷氨酸生产菌的主要特征;2 短杆菌属(Brevibacterium);;二、谷氨酸棒状杆菌基因组研究进展;目前应用发酵法生产L-乳酸常用的微生物仅有两大类:一类为细菌,多采用乳酸菌,另一类为根霉。根霉可以直接利用淀粉质原料生产L-乳酸,但是产酸量低,副产物多,转化率低。Sauer等构建了包含乳杆菌L-乳酸脱氢酶基因的毕氏酵母,它利用木糖发酵,初始浓度为100g/L，生产L-乳酸达到58g/L，比利用葡萄糖产生乳酸的水平高。;三、现有谷氨酸生成菌的主要特征;（8）异柠檬酸裂解酶活力弱，乙醛酸循环弱。 （9）α-酮戊二酸氧化能力微弱。 （10）NADPH2进入呼吸链能力弱。 （11）柠檬酸合成酶、乌头酸梅、异柠檬酸脱氢酶以及谷氨酸脱氢酶活力强。 （12）能利用醋酸，不能利用石蜡。 （13）具有向环境中泄露谷氨酸的能力。 （14）不分解利用谷氨酸，并能耐高浓度的谷氨酸，产谷氨酸5%以上。 ;第二节 国内谷氨酸生产菌及其比较 ;2、培养特征;3、生理特征;二、钝齿棒杆菌(AS1542)的形态和生理特征;2、 培养特征;★ 对氧的要求：兼性厌氧。 ★ 与温度的关系：菌株20~37 ℃ 培养生长良好，不耐高温，42 ℃ 不生长。 ★ pH的影响： pH6~9生长良好， pH10生长微弱， pH4~5已不能生长。 ★ 还原硝酸盐：反映强烈。 ★ 石蕊牛奶培养：7d后微产碱。 ★ 水解淀粉，不分解纤维素。 ★ 对尿素的耐力，2.6%以上生长受抑制。 ★ 脲酶试验：强阳性反应。 ★ 产酸物质的测定： G、果糖、甘露糖、蔗糖、麦芽糖、水杨苷、七叶灵等迅速产酸。 ★ 生长因素试验：生物素是必需生长因子。;三、天津短杆菌(T613)的形态和生理特征;2、培养特征;3、生理特征 ;四、北京棒杆菌(7338)与钝齿棒杆菌(B9)的比较;2.5 天津短杆菌(T613)与钝齿杆菌(B9)的比较 ;第三节 谷氨酸生产菌在发酵过程中的形态变化 ;二、谷氨酸发酵不同阶段的菌体形态 ;产酸型细胞：发酵16-20h后。细胞为含磷脂不足的异常状态，呈伸长、膨大、不规则状，缺乏V字形排列。发酵后期，细胞较长，呈有明显的横隔的多节细胞，产酸高。;三、谷氨酸发酵感染噬菌体后的菌体形态 ;在发酵中、后期感染噬菌体后,菌???细胞形态不规则,边缘不整齐,有的边缘似乎有许多毛刺状的东西,有细胞碎片 。;第四节、谷氨酸发酵的代谢控制育种 ;2、小剂量诱变刺激;3、高产菌制作安瓿管;二、选育耐高渗透压菌种;三、 选育不分解利用谷氨酸的突变株 ;;第五节 利用生物工程新技术选育谷氨酸生产菌 ;钝齿棒杆菌B9 (细胞个体大、易于提取；产酸率低);二、应用转化法;三、应用转导法;四、应用重组DNA技术;第六节 菌种的扩大培养和种子的质量要求 ;二、菌种扩大培养的过程;;;一级种子培养的质量要求：;;二级种子培养操作流程;二级种子培养的质量要求：;三、影响种子质量的主要因素;本章作业：;本章结束 感谢观看！