圆二色和等温滴定微量热技术研究人血清白蛋白与锌离子的结合机制＊.pdf

世界科学技术—中医药现代化★中药研究 圆二色和等温滴定微量热技术研究人血清白蛋白 与锌离子的结合机制＊ 1，2 2 ＊＊ 1，2 1，2 周 洁 ，玉延华 ，胡 炜 ，付 强 （1. 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 南宁 530004； 2. 广西大学生命科学与技术学院 南宁 530004） 摘  要：目的：体外利用圆二色和等温滴定微量热技术获得人血清白蛋白（HSA ）与锌离子（Zn2+ ）相互 作用的二级结构信息与热力学参数，认识Zn2+ 与HSA 之间的相互作用机制，为探索并发挥微量元素在人体 内的作用潜力提供科学依据。方法：采用圆二色技术和等温滴定微量热技术；HSA 浓度设置为由低到高的 -1 -1 -1 -1 2+ -1 · · · · · 梯度，分别为0.025 mmol L 、0.05 mmol L 、0.1 mmol L 、0.2 mmol L ，Zn 浓度5 mmol L 。结果：圆二色 2+ 2+ α 检测到不同浓度的HSA 与Zn 相互作用后二级结构发生变化，由低到高浓度的HSA 与Zn 结合后 - 螺 -1 · α 旋含量随之降低，当HSA 浓度为0.2 mmol L 时 - 螺旋含量表现特殊；进而所进行的等温滴定微量热实 N ΔS 验获得一整套有关分子相互作用的热力学信息，包括结合常数（K ）、反应的化学计量数（ ）、熵（ ）和焓 b -1 -1 ΔH · ׃ · ׃ （ ），发现当ZnSO4 （mmol L ）HSA （mmol L ）=5 0.2 时，有两类结合位点。不同浓度的HSA 分别与 2+ -1 · α Zn 结合，表现出不同构象变化，特别当HSA 浓度达到0.2 mmol L 时，- 螺旋含量急剧降低，蛋白质